食酸戴尔福特菌

无机磷细菌培养基（不含琼脂）是专为“溶磷菌”筛选与活性测定设计的合成液体培养基。其配方精髓在于“难溶磷”：磷酸三钙〔Ca₃(PO₄)₂〕以悬浮颗粒形式存在，不提供任何磷；葡萄糖或甘露醇担任碳源，硫酸铵为氮源，并辅以Mg²⁺、K⁺、微量元素及磷酸盐缓冲液，pH稳定在6.8–7.2。唯有能分泌有机酸、质子或磷酸酶的细菌，方可将不溶性磷转化为可溶PO₄³⁻，供自身同化并释放到液相中，使原本乳白的悬浊液逐渐澄清，上清有效磷浓度上升，实现“溶磷”可视化与可量化。实验流程简洁高效：250 mL三角瓶装50 mL培养液，接入土壤或根际稀释液，28℃、170 r/min振荡培养5–7天；每24 h取样离心，钼锑抗比色法测定钼蓝吸光度，绘制“溶磷-时间”曲线。高效菌株72 h内上清磷浓度可突破200 mg·L⁻¹，pH降至4.5以下，溶磷率与酸度呈明显负相关。若需高通量比较，可改用96深孔板，同步测定OD₆₀₀与可溶性磷，计算单位生物量溶磷效率，快速锁定优良菌株。质量控制要点：灭菌后磷酸三钙易沉降，使用前需涡旋或磁力搅拌重悬；背景可溶磷须低于0.5 mg·L⁻¹，避免假阳性。储存过程若出现絮凝，多为钙-蛋白复合物，可超声打散，不影响活性。小小耐热芽孢芽孢杆菌，用极端环境下的生存智慧，为人类工业、农业和环保打开一扇“高温之门”。食酸戴尔福特菌

施氏芽孢杆菌（Bacillus smithii）是芽孢杆菌属中少见的“高温工匠”，标准菌株 JCM 9076 更早从堆肥深处分离，可在 30–65 ℃、pH 4.5–9.0 范围内旺盛生长，更适温度 55 ℃，芽孢耐 100 ℃沸水 2 h 仍存活，是验证高压蒸汽灭菌的指示菌之一。其耐热关键在于芽孢内高浓度吡啶二羧酸钙（DPA-Ca）结合低水分状态，配合小分子热休克蛋白，使酶与 DNA 在高温下依旧稳定。2024 年，中国团队从湖南镉污染稻田筛选到解磷菌株 M2（保藏号 CCTCC M2024167），鉴定为 B. smithii。该菌可在 50 mg L⁻¹ Cd²⁺、6 % NaCl 条件下正常分泌有机酸，将难溶磷酸钙转化为磷，盆栽玉米根际有效磷提高 42 %，籽粒镉含量下降 35 %，实现“增磷减镉”同步完成。在工业酶方向，施氏芽孢杆菌是“高温酶工厂”。其耐碱性 α-淀粉酶更适温度 70 ℃，在淀粉液化、纺织退浆中可省去降温环节，节能 15 %；耐热蛋白酶在 60 ℃、30 % 乙醇中仍保持 80 % 活性，为生物炼制提供新型催化剂。农业应用上，M2 菌株与秸秆堆肥复配，可使堆体 24 h 升至 65 ℃，纤维素降解率提高 30 %，堆肥周期缩短 7 d；作为功能性菌剂，每亩基施 200 g 菌粉，冬小麦越冬前磷吸收量提高 18 %，分蘖数增加 1.2 个，对后期倒伏有明显缓解作用。柔毛匍柄霉侄子根瘤菌是土壤里的微型氮厂，直径不过微米，却能把天空搬上餐桌。

耐热芽孢杆菌（Geobacillus stearothermophilus）是微生物世界的“高温铁人”。其更适生长温度55–65 ℃，芽孢可耐100 ℃沸水2小时、紫外线辐照8小时仍存活，被广用于检验高压灭菌效果。该菌的耐热密码在于：细胞膜富含支链脂肪酸和钙-吡啶二羧酸复合物，降低膜流动性；组蛋白样蛋白紧紧包裹DNA，防止高温断裂；同时拥有一套高效热休克蛋白（Hsp）系统，可快速修复变性蛋白。在工业酶领域，耐热芽孢杆菌是“催化剂工厂”。其分泌的耐高温α-淀粉酶在90 ℃、pH 6.0条件下活性比较高，可将淀粉液化时间缩短一半，广用于酒精、制糖、纺织退浆，年市场需求超万吨；耐热蛋白酶则在60 ℃仍保持80 %活性，可用于洗涤剂，提高低温洗衣的去污力。此外，该菌还能合成耐高温木聚糖酶和脂肪酶，在造纸漂白和生物柴油合成中展现潜力。农业与环境方面，科学家将其与堆肥菌系复配，使堆温迅速升至65 ℃，加速有机质分解，杀灭病原菌和杂草种子，缩短堆肥周期30 %；在油田，耐热芽孢杆菌可耐受55 ℃、高盐环境，利用原油为碳源，产生生物表面活性剂，提高采收率5–8 %。

肉汤培养基（测磷细菌菌数）是一种把“富营养”与“溶磷筛选”合二为一的液体计数培养基。它在传统牛肉膏蛋白胨肉汤基础上进行精简：牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g提供碳氮和生长因子；磷源改为0.2 g难溶性磷酸三钙，经球磨过300目，悬于蒸馏水中呈乳白混悬液；pH调至7.0±0.2，分装试管后121℃灭菌15 min，冷却振荡重悬即可接种。由于无琼脂，培养基既保持肉汤的高营养促生优势，又以悬浮颗粒Ca₃(PO₄)₂为“磷开关”，可同步完成溶磷功能验证和菌数测定，适用于土壤、根际或堆肥浸出液中溶磷菌群的快速评估。操作方法沿用比较大可能数（MPN）法：将样品按10⁻¹–10⁻⁶梯度稀释，各取1 mL加入含5 mL肉汤培养基的螺口管，每稀释度3重复，28℃静置培养48 h。溶磷菌生长使Ca₃(PO₄)₂颗粒被酸溶解，培养液由乳白→局部透明→全管澄清，并伴随菌膜形成；非溶磷菌虽可增殖，但培养基保持混浊无透亮。以“出现澄清+菌膜”为阳性管，查MPN表即可算出每克样品的溶磷菌数，全程只需3天，比平板溶磷圈法缩短一半时间。质量控制要点：灭菌后磷酸三钙易沉降，使用前需涡旋混匀；若肉汤本身含磷（牛肉膏批次差异），可先用磷钼蓝法测可溶磷，超过5 mg L⁻¹即弃用。该菌还能合成耐高温木聚糖酶和脂肪酶，在造纸漂白和生物柴油合成中展现潜力。

拟圆孢线黑粉菌（Filobasidium globisporum）隶属担子菌门、线黑粉目，是一类以冻干粉形式保存、生物危害四类的非模式菌，却在低温酶学与绿色技术领域展现巨大潜力。一、分类与培养特性菌株为乳白色、湿润的酵母状菌落，更适培养温度20℃，可在4–10℃长期冷藏存活2–25年；YPM培养基（甘露醇20g/L、酵母提取物、蛋白胨）即可满足生长，液体培养需避免长时间静置以保持活性。二、低温酶工厂在20℃条件下，该菌分泌高活性纤维素酶、β-葡萄糖苷酶和木质素降解酶，10℃时仍保留70%以上酶活，适合冷链废弃物处理、低温洗涤和纸浆漂白，可节省蒸汽能耗约20%。三、代谢产物多样发酵液中可检测抗生物质、色素及胞外多糖，对革兰氏阳性细菌具有明显抑制圈；其胞外多糖乳化力强，已作为天然增稠剂用于食品与化妆品小样试制。四、环境修复潜力菌丝体对苯酚、重金属Cd²⁺、Pb²⁺表现出吸附-降解双重作用，5d内可将50mg/L苯酚降至5mg/L以下，吸附铅量达45mg/g，为低温含酚废水、重金属污染水体提供生物修复候选。五、科研与安全作为四类危害微生物，操作只需BSL-1基础实验室；冻干粉复苏快、ITS序列清晰，是研究担子菌低温酶调控、孢子长期保存及冷链机制的理想模式菌。科学家正给它植入耐旱、耐盐基因，让它在西北旱地也能结瘤。霍利斯格里蒙菌

菌体还可吸附Au³⁺、Cd²⁺，吸附量分别达50mg/g与35mg/g，为矿区重金属修复提供低成本方案。食酸戴尔福特菌

牛奶类芽孢杆菌（Paenibacillus lactis）更早从原料奶和干酪凝块中被分离，因而得名。它呈短杆状，革兰氏阳性，具周生鞭毛，可形成椭圆芽孢，更适30–37℃、pH 6–7，耐干燥、耐冷链，是乳品环境中常见的“温和住客”。一、乳品益生菌株MB2401能分泌胞外多糖，在酸奶发酵中与 Streptococcus thermophilus 协同，可提升黏度、减少乳清析出，延长货架期7天；同时产细菌素 Lactocin 2401，对单增李斯特菌抑菌带宽达22mm，为原奶生物保鲜提供天然“护栏”。二、肠道健康牛奶类芽孢杆菌耐胃酸、耐胆盐，能形成芽孢穿越胃肠道，在结肠萌发后分泌果聚糖酶，降解膳食多糖产生丁酸，降低pH，抑制沙门氏菌定植；小鼠试验显示，日灌胃10⁸ CFU，血清IgA提高35 %，腹泻率下降60 %，已列入欧盟QPS清单，安全等级高。三、工业酶潜力其低温普鲁兰酶在10℃仍保持70 %活性，可用于乳清寡糖制备；耐碱脂肪酶更适pH 9、40℃，在CIP管道清洗中分解乳脂肪，节能15 %，减少化学碱用量。四、农业应用将菌株NZ1制成活菌数10⁸ CFU mL⁻¹的“乳菌肥”，滴灌奶牛场周边青贮玉米，土壤有机质提高12 %，产奶净能增加8 %，实现种养循环。食酸戴尔福特菌