EAE模型是自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis)的动物模型,它是多发性硬化症(MS)的常用研究工具。这个模型通过引起小鼠或大鼠免疫系统攻击其自身神经组织而导致神经损伤和症状,从而研究MS的病理生理学、免疫学和***方法。模型的建立需要给实验动物注射特定蛋白结构,如脊髓蛋白、脑蛋白等,以激发其免疫系统并模拟MS的症状。该模型的应用范围普遍,包括探究疾病***药物的有效性、研究免疫系统攻击神经组织的机制等。EAE通常用作细胞介导的特异性的自身免疫疾病的模型。上海真实的eae模型动物实验外包

不同品种或同一品种不同品系动物对EAE的易感性主要受免疫反应基因(Ir基因)影响,Ir基因的调节作用表现为T细胞表面受体对髓鞘碱性蛋白(MBP)的特异性表达。动物的种类不同,其受体表达能力不同,对自身抗原的反应性不同,因而对EAE的易感性也不同,因此在选择动物时需要寻找EAE模型的敏感动物。鉴于对EAE敏感的Lewis、DA大鼠,PL/J,SJL/J小鼠的价格昂贵、不宜获得且难以饲养,国内多采用价廉易得的Wistar大鼠,但其敏感性不及前者。上海真实的eae模型动物实验外包将抗原与佐剂的混合乳剂直接注射至动物体内,经过一定时间的潜伏期,诱导EAE模型的产生。

自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型是古老、比较常用的人类MS实验模型。EAE包括了MS中观察到的病理特征,包括:炎症脱髓鞘轴突丧失神经胶质过多症该模型还可以研究炎症和髓鞘再生的解决反调节机制。但是,MS的每个方面都需要在EAE模型中进行单独研究,增加了数据分析的难度。此外,研究中使用的不同试剂可能会导致不同程度的疾病。在小鼠中,使用不同浓度的百日咳***进行实验性血液屏障损伤后,通过主动免疫诱导EAE。通过使用含有能够***先天免疫系统的细菌成分的佐剂实现对髓磷脂抗原的敏感作用。由于人类中的活化抗原尚不清楚,因此使用多种CNS组织抗原如髓鞘碱性蛋白(MBP)、蛋白脂质蛋白(PLP139-151)或髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白肽35-55(MOG35-55)诱导产生EAE。
通常不同品种动物对同一抗原的敏感性不同、不同抗原的抗原性也不同,并且不同来源的同一抗原的活性也有明显差异。一般情况下,抗原性强弱依次为豚鼠脊髓>大鼠脊髓>牛脊髓,脊髓组织>脑组织,豚鼠MBP>牛MBP。蛋白或多肽单体不但结构明确,而且可以精确定量,因此利于进行EAE发病机制研究,但不易获得。脊髓匀浆和脑组织匀浆两种抗原均含有多种抗原表位,且易于获得,适用于多种动物,但其成分复杂,不易精确定量,这给某些特殊研究造成不便。诱导鼠类产生EAE模型的异种抗原,以新鲜豚鼠脊髓制备的抗原佐剂乳化物为比较好。在一定范围内抗原的量和EAE的发病率及发病程度有相关性,注射抗原佐剂乳化物的剂量越大,EAE的发病率越高。抗原的剂量可因动物的品系、抗原种类、免疫方法、研究目的等的不同而有很大变化。另外,抗原的物理状态也很重要,高分散度的抗原易于被吞噬和递呈,进而较高效率地***免疫系统。EAE动物模型是研究MS病理过程、发病机制的重要途经,在临床神经免疫学的研究中具有重要意义。

获取实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠小胶质细胞,并检测其特性。方法取8周龄,雌性C57BL/6小鼠行EAE造模,待至发病高峰期(第15天)时以PBS灌注后取小鼠后脑和脊髓,切碎后加胰酶消化,消化完成后通过100μm滤网滤过,而后采用Percoll密度梯度离心法分离获取单个核细胞,进一步利用CD11b与CD45抗体染色,通过流式细胞仪分选CD11b~+CD45~(high)和CD11b~+CD45~(low)细胞,即分别得到相对活化和静息的小胶质细胞,***对流式分选获取的小胶质细胞行qPCR检测。结果通过形态比较,获得了高纯度的小胶质细胞。FIZZ-1基因行qPCR检测,结果显示在EAE急性期M2型小胶质细胞明显增多,符合文献报道。结论该方法能从EAE小鼠体内分离获取高纯度的小胶质细胞,可用于相关目的基因后续检测。EAE具有复杂的神经药理学特征,许多目前已用或即将使用的MS药物得以开发、测试或验证,基于EAE研究。上海真实的eae模型动物实验外包
EAE动物模型已经证实了髓鞘蛋白特异性CD4+T细胞、CD8+T细胞和Th17细胞的致脑炎作用。上海真实的eae模型动物实验外包
EAE模型的发展与年龄密切相关。幼龄动物发病后症状很快达到高峰,随后又迅速恢复,和成年动物相比病程较短,其抗原注射部位及CNS内的炎性细胞浸润程度较轻,并且幼龄动物体重偏小,一般情况差,易出现麻醉意外而死亡。若动物体重(周龄)偏大,则发病延迟,且症状较重,所以选择受试动物以青年期为佳。但若作为抗原提供者,其年龄可适当放宽,一般大于4周即可。MS多为青年女性,EAE的发生也存在性别差异。一般来讲,雌性动物较雄性敏感,表现在雌性动物的发病率高,临床症状相对严重,如Wistar大鼠及SJL/J小鼠,但也有的动物如Lewis大鼠,雄性较雌性敏感。另外实验时间选择在夏季比冬春季节诱导动物模型的敏感性更高。敏感性高的动物,有时症状较严重且死亡率高,应引起注意。上海真实的eae模型动物实验外包