南京山羊精子分析ALH

美国HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOXIVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。CASA系统可以给出多种精子运动状态的参数，这些参数能够帮助更有效地了解精子的运动特性。南京山羊精子分析ALH

五、精子活动力检测[正常参考值]**后30-60分钟活动力为Ⅲ级以上的精子＞0.80：**后120分钟内活动力为Ⅲ级以上的精子＞0.60；**120分钟后0.25-0.60的精子仍能活动。[临床意义]活动不良或不活动的精子增多，是导致不育的重要原因之一。常见于精索静脉曲张、泌尿生殖系的非特异性***如大肠杆菌***，某些代谢药、抗疟药、雌***、氧化氮芥等，也可使精子活动力下降。六、精子计数[正常参考值](100-150)×109/L或一次排精总数为(4-6)×108。[临床意义]1．精子计数小于20×109/L或一次排精总数少于1×108为不正常，见于精索静脉曲张、铅金属等有害工业污染、大剂量放射线及某些药物影响。2．精液多次未查到精子为无精症，主要见于睾丸生精功能低下，先天性输精管、精囊缺陷或输精管阻塞。输精管结扎术2个月后精液中应无精子，否则说明手术失败。3．老年人从50岁开始精子数减少以至逐步消失。广州快速运动精子分析重复性高精子分析，平均角位移（MAD）‌：精子头沿其曲线轨迹瞬时转折角度的时均J对值‌。

二、生化及免疫学检验：1、精浆果糖测定【正常参考值】9.11-17.67mmol/L。【临床意义】（1）精液果糖为0，可见于先天性两侧输精管及精囊腺缺如、两侧输精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常见于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可导致精子运动能量缺乏，甚至不易受孕。2、精浆酸性磷酸酶测定【正常参考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【临床意义】（1）精浆酸性磷酸酶含量增高，常见于前列腺肥大或早期前列腺恶性**患者。（2）精浆酸性磷酸酶含量降低，常见于前列腺炎患者。（3）精浆酸性磷酸酶检测是法医鉴定有无精液**敏感的方法。3、精浆顶体酶活性测定【正常参考值】36.72±21.43U/L。【临床意义】精子顶体酶活力与精子密度及精子顶体完整率呈正相关，其活力不足，可导致男性不育。4、精浆乳酸脱氢酶-X同功酶(LDH-X)测定【正常参考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相对活性：≥0.426。【临床意义】LDH-X具有睾丸及精子的组织特异性，是精于运动获能的关键酶，该酶检测可作为诊断男性不育有价值的指标。睾丸萎缩患者LDH-X降低或消失，精子发生缺陷时无LDH-X形成，少精或无精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。

精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后，滴于血细胞计数板上，在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。将已经液化的精液标本均匀混合，用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀释液至11刻度，振荡三分钟，然后置于血球计数板内，计数二大格（每格面积1平方毫米）之精子数，在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个，则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制：重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用，福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时，可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内，稀释后进行计数。如精子的数目极少，亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的，还有25%是由输精管道的其他部分来的，因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查，才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。通过计算机图像处理功能对显微镜下放大的精子图像进行识别和跟踪计算，从而得出精子动静态各项参数。

全自动的IVOS可以提供**快的分析速度以及高质量数据输出。可以使用一次性的和可重复的载玻片，深度从10um～100um。每次分析捕捉100帧图像，扫描速度每秒60帧。**的软件升级。IVOS能提供：精确、客观、具有重复性的结果。高速分析，在60Hz下半秒扫描30帧，为实验室节省成本。[1]主要功能IVOS自动精子活动、浓度、形态分析系统。HamiltonThorne的CASA系统适用于临床、研究实验室、动物繁殖基地、水产业、制药公司等各种领域，成为了精液分析业的金标准。可以应用于包括人类、公牛、马、野猪、狗、兔子、老鼠、绵羊、山羊、鱼以及各种濒危动物。在TOXIVOS上有**的大鼠精液分析软件。Hamilton Thorne精子分析仪采用先进的光学成像，能够实时分析精子的动力学参数，提供有效的精子质量评估。南京山羊精子分析ALH

CASA系统用量少，检测速度快，能够显著提高实验室的工作效率。南京山羊精子分析ALH

人类精子冷冻保存和储存：增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容，更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议：将样本分管分罐分开储存；对使用的材料和留存标本建立定期核验程序；所有储罐都应有液位监控报警系统，以监测温度和液氮液位，传感器应连接警报器，可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明，玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻，可以防止冰晶的形成，并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中，也可以使用封闭系统，不需要无菌的液氮。南京山羊精子分析ALH