CAS培养基,也称为ChromeAzurolS(CAS)检测培养基,主要用于检测微生物是否产生铁载体(siderophore)。铁载体是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质,对于微生物在缺铁环境中的生长至关重要。CAS培养基的特点主要包括:1.**成分**:CAS培养基包含铬天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化铵(HDTMA)、铁离子等成分,这些成分与微生物分泌的铁载体反应,产生颜色变化,从而可以判断微生物是否产生铁载体。此外,培养基中还包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、氯化钙等,提供微生物生长所需的碳源、氮源和其他生长因子。2.**颜色变化**:当微生物产生的铁载体与CAS培养基中的复合物结合后,会夺走铁离子,使培养基颜色由蓝色变为橘黄色,出现铁载体分泌圈,这有助于判断细菌是否产生铁载体。3.**pH值**:CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保证微生物的生长和铁载体的活性。4.**配制方法**:CAS培养基的配制方法相对复杂,但一些产品如Coolaber改良的CAS琼脂培养基已经进行了改良,减少了实验准备时间。该产品分为培养基基础、已灭菌的缓冲剂和已灭菌的CAS检测液三个部分,使用时只需将这些组分按说明混合即可。MEE肉汤(MEE Broth)是一种用于肠道菌选择性增菌培养的培养基。如大肠杆菌等肠杆菌科细菌的检测和分离。SCCRAM 肉汤
支原体培养基基础(含精氨酸)是一种专门用于培养支原体的微生物培养基,其特点主要包括:1.**成分**:该培养基包含月示胨、蛋白胨、牛肉浸粉、牛心浸粉、氯化钠、葡萄糖、酵母浸粉、苯酚红和L-精氨酸等成分。这些成分为支原体提供氮源、维生素、矿物质,以及碳源和必要的生长因子。其中,L-精氨酸是可水解的氨基酸,苯酚红作为pH指示剂。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.6-7.8(25℃),以保证支原体的生长环境。3.**培养基配制**:使用时,需要称取培养基基础33克,溶解于1000mL蒸馏水中,经过121℃高压灭菌15分钟后冷却至室温。然后无菌操作加入马血清100mL、青霉素80万单位和1%醋酸铊10mL,混匀后分装无菌试管,放置-20℃保存。4.**应用**:适用于培养支原体的基础培养基,尤其适合于利用精氨酸的支原体,如口腔支原体等。支原体可以利用培养基中的精氨酸,使培养基pH值升高,遇指示剂酚红使培养基变红,从而可以判断支原体的生长情况。5.**灵敏度检查**:通过变色单位试验法(CCU)进行灵敏度检查,以确保培养基能够有效地检测到支原体的存在。兔血清去氧胆酸盐琼脂(Desoxycholate Lactose Agar,简称DC)是一种在微生物检测中常用的选择性培养基。
营养肉汤(NutrientBroth,简称NB)是一种常用的细菌培养基,它的定义、应用和制备方法如下:1.**定义**:营养肉汤,也被称为普通肉汤,是一种用于细菌类疫苗检验的培养基,如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**:营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**:营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制备方法**:-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml,混合后微热溶解,然后调整pH值至7.4-7.6,滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中,搅拌均匀后,使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2,然后分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**:营养肉汤用于细菌的培养,尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。
尿素培养基是一种用于检测细菌是否具有尿素酶活性的微生物培养基。其特点主要包括:1.**成分**:尿素培养基的主要成分包括蛋白胨、氯化钠、磷酸二氢钾、尿素、葡萄糖、酚红指示剂和琼脂等。蛋白胨提供碳源和氮源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾作为缓冲剂;尿素作为底物检测细菌是否具有尿素酶活性;酚红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃),以保证微生物的生长环境和酶活性的发挥。3.**尿素酶检测**:某些细菌能产生尿素酶,将尿素分解产生氨,使培养基变为碱性,酚红指示剂在pH升高时变色(通常为粉红色),通过观察颜色变化来判断细菌是否具有尿素酶活性。4.**配制方法**:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装。高压灭菌后,冷至50~55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液,pH应为7.2±0.1。分装于灭菌试管内,放成斜面备用。5.**应用**:尿素培养基主要用于鉴定革兰氏阴性菌中的尿素酶活性,如用于肠杆菌科细菌的鉴定,例如大肠埃希菌和奇异变形杆菌等细菌具有尿素酶活性,而鲍曼不动杆菌则不具备尿素酶活性。LB琼脂平板在细菌的分离、鉴定、计数以及遗传工程实验中都有广泛的应用。
改良卵磷脂肉汤(ModifiedLetheenBroth,MLB)是一种用于微生物检测的培养基,它在抗菌洗手液细菌检测中具有实用性。以下是改良卵磷脂肉汤的一些特点和制备方法:1.**成分**:改良卵磷脂肉汤的主要成分包括牛肉提取物、酵母提取物、蛋白胨、胰蛋白胨、吐温-80、卵磷脂、氯化钠和亚硫酸盐。这些成分提供了碳氮源、维生素和生长因子,同时卵磷脂和吐温-80有助于中和防腐剂,并在乳浊液中分散物质。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在6.9~7.3之间。3.**制备方法**:-称取42.8g的培养基粉末,加入1000mL的蒸馏水或去离子水中。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到试管中,进行121℃高压灭菌15分钟。4.**应用**:改良卵磷脂肉汤用于化妆品微生物检测中的样品稀释和增菌。它能有效中和抑菌类产品中的抗(抑)菌活性物质,提高微生物检出率。5.**质量控制**:使用特定的质控菌株进行生长测试,确保培养基的质量符合标准。例如,金黄色葡萄球菌ATCC6538、大肠埃希氏菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853在该培养基上应有良好的生长情况。在VRBA培养基上,大肠杆菌菌落为带有沉淀环的紫红色或红色,而其他非目标菌则可能呈现不同的颜色和形态 。改良Gorodkowa琼脂
西蒙氏柠檬酸盐琼脂的主要成分有氯化钠、柠檬酸钠、磷酸二氢铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、溴麝香草酚蓝和琼脂。SCCRAM 肉汤
富集培养基是一种在微生物学中用于从复杂微生物群落中选择性培养目标微生物的培养基。其主要特点和应用如下:1.**选择性培养**:富集培养基通过增加特定营养条件或改变环境条件,从复杂的微生物群落中选择性地培养出目标微生物。这种培养基的设计基于不同微生物对营养物质的利用能力和生长特性的差异,利用这些差异来选择性地培养出目标微生物。2.**目标微生物特性**:富集培养基的制备需要明确目标微生物的特性和所需营养物质。目标微生物可能对某种特定的碳源、氮源或微量元素有特殊的需求。因此,在富集培养的过程中,需要选择适当的富集培养基,以提供目标微生物所需的营养物质。3.**抑制其他微生物**:在富集培养基中,可以添加一些抑制其他微生物生长的物质,以防止其他微生物的干扰。4.**培养条件**:富集培养需要合适的培养条件。不同微生物对温度、pH值和氧气需求有所不同,因此在富集培养中需要根据目标微生物的需求来调节这些条件。5.**应用广**:富集培养基在工业微生物产生菌的分离筛选中非常重要,尤其是在从微生物混合群中引向纯培养的一种培养方法。例如,杜宗军教授课题组设计了新的富集培养基和富集条件,分离出了大量的海洋细菌新类群。SCCRAM 肉汤