胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)是一种通用的营养培养基,广泛应用于各种微生物的培养。以下是TSB的一些关键特点和应用:1.**成分**:TSB的主要成分包括胰蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾和葡萄糖。这些成分提供微生物所需的氮源、维生素、生长因子、碳源、缓冲剂和渗透压维持剂。2.**pH值**:TSB的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃)。3.**制备方法**:称取TSB培养基30.0g,加热搅拌溶解于1000ml纯化水中,分装于试管或其他容器中,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**应用**:TSB培养基用于药品及生物制品的无菌测试及药品微生物限度检查中供试品的稀释或增菌。它特别适合于无菌工艺环境中源自人体的细菌、芽孢和菌的培养。5.**质量控制**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉等,放置30-35℃需氧培养18-24小时,以确保培养基的质量符合标准。6.**储存条件**:TSB培养基应贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖;未开封产品保质期三年。去氧胆酸盐琼脂(Desoxycholate Lactose Agar,简称DC)是一种在微生物检测中常用的选择性培养基。强化梭菌培养基
Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。GVPC琼脂添加剂TSI 培养基成分明确,有助于准确分析细菌的生化反应,是一种可靠的细菌鉴别培养基。
巴氏芽孢杆菌固体培养基的特点主要包括以下几个方面:1.**多层保护结构**:巴氏芽孢杆菌的芽孢具有多层保护结构,包括芽孢外壳和芽孢皮层,这些结构由多种蛋白质组成,能够在恶劣环境下保护细菌的基因组。2.**高抵抗力**:芽孢对热、紫外线、化学试剂和辐射等环境压力具有极高的抵抗力。这种抵抗力部分归因于芽孢外壳和皮层的特殊结构,以及芽孢中心中的低水分含量和高浓度的二价阳离子与二吡咯烷酮酸(DPA)的结合。3.**特定的培养条件**:巴氏芽孢杆菌的芽孢形成需要特定的培养条件,包括营养和环境因素。例如,使用改良的Schaeffer培养基和特定的温度(如30°C)和时间(18-24小时)来诱导芽孢形成。4.**特定的化学成分**:固体培养基的化学成分对芽孢的形成和特性有重要影响。例如,CASOAGAR+20g/L尿素是一种用于巴氏芽孢杆菌的培养基,其成分包括酪蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化钠和琼脂,pH值为7.3。5.**芽孢的萌发**:芽孢外壳必须既具有保护性又具有渗透性,以允许小分子萌发剂通过并触发芽孢的萌发过程。萌发剂包括糖类、氨基酸、肽聚糖片段和离子。
牛心汤琼脂(BeefHeartInfusionAgar)是一种常用的微生物培养基,它的特点主要包括:1.**营养丰富**:牛心汤琼脂含有牛心浸粉、蛋白胨、葡萄糖、碳酸氢钠、氯化钠和无水磷酸氢二钠等成分,为微生物提供碳源、氮源以及必需的无机盐和维生素。2.**pH稳定**:培养基的pH值通常控制在7.4±0.2(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**应用广**:适用于多种微生物的培养,特别是对于需要较高营养需求的细菌,如链球菌和肠球菌等。4.**制备方法**:将牛心汤琼脂的粉末配方溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌。灭菌后冷却至适宜温度,可添加血液等成分,倾注于平板中使用。5.**质量控制**:使用标准菌株进行质量控制,确保培养基能够支持目标微生物的生长。6.**储存条件**:通常建议在阴凉干燥的条件下储存,以保持其稳定性和有效性。牛心汤琼脂因其营养成分和广的适用性,成为微生物实验室中的常用培养基之一。麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素琼脂(MIAC)主要用于食品中克雷伯氏菌的分离培养。
胆汁七叶苷琼脂(BileEsculinAgar,简称BE琼脂)是一种用于微生物学研究的选择性培养基,特别适用于肠球菌和链球菌(尤其是血清组D)的分离和鉴定。以下是它的一些主要特点:1.**选择性成分**:含有胆汁和七叶苷,胆汁能够抑制革兰氏阳性菌的生长,而七叶苷作为一种指示剂,可以被特定的细菌水解生成七叶内酯,后者与培养基中的铁离子反应产生棕黑色沉淀,有助于菌落的鉴别。2.**营养成分**:通常包含肉浸粉、蛋白胨、牛胆汁、柠檬酸铁和琼脂等,为细菌提供必要的营养和生长环境。3.**pH调节**:pH值通常控制在7.2±0.2,以保证细菌的适宜生长条件。4.**应用范围**:主要用于食品和药品中肠球菌和链球菌的初步鉴定,也用于从临床样本中分离这些菌种。5.**培养条件**:通常在35ºC下培养18-24小时,观察菌落的生长情况和是否产生棕黑色变。6.**菌落特征**:肠球菌和某些链球菌在BE琼脂上生长时,能够产生棕黑色的菌落,这是由于七叶苷被水解并产生沉淀所致。其含有酚磺酞指示剂,可根据颜色变化清晰指示细菌发酵糖类产生的酸碱性变化,便于观察。氮源实验液体培养基
LB琼脂主要由胰蛋白胨(10g/L)、酵母提取物(5g/L)、氯化钠(10g/L)和琼脂(15-20g/L)组成。强化梭菌培养基
CAS培养基,也称为ChromeAzurolS(CAS)检测培养基,主要用于检测微生物是否产生铁载体(siderophore)。铁载体是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质,对于微生物在缺铁环境中的生长至关重要。CAS培养基的特点主要包括:1.**成分**:CAS培养基包含铬天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化铵(HDTMA)、铁离子等成分,这些成分与微生物分泌的铁载体反应,产生颜色变化,从而可以判断微生物是否产生铁载体。此外,培养基中还包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、氯化钙等,提供微生物生长所需的碳源、氮源和其他生长因子。2.**颜色变化**:当微生物产生的铁载体与CAS培养基中的复合物结合后,会夺走铁离子,使培养基颜色由蓝色变为橘黄色,出现铁载体分泌圈,这有助于判断细菌是否产生铁载体。3.**pH值**:CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保证微生物的生长和铁载体的活性。4.**配制方法**:CAS培养基的配制方法相对复杂,但一些产品如Coolaber改良的CAS琼脂培养基已经进行了改良,减少了实验准备时间。该产品分为培养基基础、已灭菌的缓冲剂和已灭菌的CAS检测液三个部分,使用时只需将这些组分按说明混合即可。强化梭菌培养基