关闭真空。同样,溶液将被吸收到印迹架中,并且表面可能看起来干燥。重要提示:孵育10分钟后,再抽真空。11.向下压框架并施加真空。等待5至8秒钟,直到框架完全空了。真空运行连续添加30 mL洗涤缓冲液(对于MultiBlot为15 mL)。重复洗涤步骤3次(共3次)4次洗涤)。12.关闭真空,然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点,并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白,则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育:一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5 mL(对于MultiBlot),5 mL(对于Mini blot)或10 mL(对于Midi blot)1X一抗(浓缩液)通常在标准免疫检测过程中使用)。3.用盖子盖住吸墨纸固定架。如果需要的话,将其从底座上海益启生物的细胞跨膜电阻仪询价联系方式。嘉定区Merck微流控细胞芯片分析仪Merck仪器参数
测 注意:所有抗体均使用0.5%NFDM作为封闭剂和Luminata™Forte Western HRP进行测试作为化学发光试剂的底物。 印迹阻止 •SNAPi.d.®2.0系统与比较常用的封闭剂兼容,包括脱脂/低脂干燥牛奶,牛血清白蛋白(BSA)和酪蛋白。许多其他市售阻滞剂也兼容(请参阅表5)。•为了确保比较佳的墨量通过吸墨架,必须完全封闭封闭液溶解且不含所有颗粒物质。在某些情况下,可能有必要降低封闭剂以达到所需的流量。•不建议使用浓度高于0.5%的脱脂/低脂干奶。•封闭剂应在含有0.1%Tween®20的tris或磷酸盐缓冲盐溶液中制备表面活性剂,以降低表面张力并确保封闭剂在印迹架上均匀分布表面。•为确保抗体在孵育步骤中均匀分布,请在封闭液中稀释抗体,包含Tween®20表面活性剂。 如何使闵行区MerckWB实验加速器Merck仪器哪家好上海益启生物Merck仪器订购方便。
有关详细信息,请参见表2。●不建议在SNAP i.d. @ 2.0系统中剥离印迹。印迹已被剥离可以从阻塞步骤开始在SNAP i.d.o 2.0系统中对遵循标准协议的系统进行重新探测。●如果不需要剥离(例如,如果使用其他二抗进行检测),则可以重新检测印迹快速清洗后,立即在SNAP i.d.9 2.0系统中使用。 优化准则抗体已经开发了优化指南,以使用户能够转换所用抗体的浓度将标准免疫检测测定法浓缩至适用于SNAP i.d. @ 2.0系统的浓度。大多数用户会能够使用相同量的抗体,但与标准品相比,体积更小,浓度更高免疫检测。但是,当使用扩展抗体方案(第12页)时,可以使用相同的方法通常用于标准免疫检测的一抗的浓度,体积和时间,其次是较高浓度的二抗,持续时间较短。表1.如何根据SNAP i.d.9
lon@CrescendoWesternHRP基材WBLUR0500500毫升Immobilon@ClassicoWesternHRP底材WBLUC0500500毫升Immobilon@WesternHRP基材WBKLS05零零5零零毫升Immobilon@ECLUltraWestemHRP基材WBULS05零零5零零毫升TMB,不溶61毫升用于免疫检测的Immobilon@信号增强剂WBSH05S05零零5零零毫升免疫印迹封闭剂20-20020克Re-BlotTMPlus强力抗体剥离解决方案,10倍25毫升Immobilon@Block-CH缓冲液WBAVDCH01S05零零毫升Immobilon@Block-FL缓冲液WBAVDFL01500毫升Immobilon@Block上海益启生物电阻仪订购方便。
恢复正确放置戴姆·贝叶'底部的针脚。 '处理了两帧首先对一帧施加真空,然后再对另一帧施加真空,以确保同时在每个框架上施加足够的真空力。MultiBlot框架用于在MuHBlot框架中进行单点印迹时,放置正确汉克处理一次印迹,然后空白卡在空井。未放入空白卡空井。 规格方面底座(长x宽x高)40.6厘米(16英寸)x 32.4厘米(12.751英寸)x 8.9厘米(3.5英寸)体重(大约)1.5kg(3.3磅)带有Ild(长x宽x高)19.7厘米(7.75英寸)x 14.7厘米(5.8英寸)x 3.6厘米(1.4英寸)的多孔吸墨纸架多色持有人11.4厘米(4.5英寸)x 6.4厘米(2.5英寸)x具有lId的迷你框架(长x宽x高)19.7厘米(7.75英寸)x 14.7厘米(5.8英寸)x 3.一个好的微流控细胞芯片分析仪需要具备哪些特点您知道吗?虹口区MerckWB实验加速器Merck仪器联系方式
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NAP i.d. @ 2.0蛋白b。 SNAP i.d.e蛋白检测.. 标准检测系统迷你印迹系统首先代,单井免疫检测用A431 EGF刺激的细胞裂解液(20至0.08 ug)转移到Immobilong-P膜上。印迹是用TBST中制备的0.5%NFDM封闭,并进行探测具有主要抗erbB2(04-291)和次要HRP-共轭山羊抗小鼠(AP124P)在以下条件下如上所示。印迹暴露于X射线胶片5分钟。 图3. Tau-1蛋白的免疫检测:SNAP i.d.2.0系统(MultiBlot,Midi和Mini)与标准免疫检测b。 SNAPi.d.o 2.0C。 SNAP i.d.8 2.01.标准一种。 SNAP id.o 2.0 MutiBlot迷你印迹Midi污点免疫检测Azheimers bran 嘉定区Merck微流控细胞芯片分析仪Merck仪器参数