抗体标记 适合25-200μg样品操作 5次低速离心，总耗时~50分钟 1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。 2. 加入抗体样品 • 对于比较稀释的样品（< 1 mg/mL） - 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）。 - 加上至多1 mL抗体样品， 4,000×g离心15 min。 • 对于浓度较高的的样品（≥ 1 mg/mL） - 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）中加入至多100μL样品。 - 在Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（建议使用50k MWCO）中加入至多100μL样品。 大体积样品浓缩 Centricon® Plus-70离心浓缩装置 用于15-70mL生物溶液的快速浓缩等操作。70mL的样品在25分钟内浓缩至350μL；死体积设计确保样品不会被离干而损失。 益启生物公司的超滤浓缩管系列有很多。杨浦区默克2ml超滤浓缩管联系人
外泌体的精制磁珠法富集精制外泌体：300μg样品（相当于300μg总蛋白）用含有5μg anti-CD63抗体的溶液稀释，与protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脱。如果要先将抗体偶联在磁珠上（以避免抗体洗脱下来对外泌体的干扰），请参考默克磁珠操作说明书。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推荐使用试剂目录号信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已经建立了基于“微滤+超滤”的外泌体制备操作标准，相较于需要昂贵的设备及繁琐操作的超速密度梯度离心，用实验室常见的工具解决外泌体制备的高大上问题，真是惠而不费，不亦乐乎？杨浦区默克离心浓缩管参数上海超滤浓缩管批发商。
离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”，操作时样品首先被浓缩，继而加入新的溶液，再次浓缩时，原溶液已经被换成选定的溶液。 化学相容性与溶出 样品的化学背景有时很多样而复杂，过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质，但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括：• 标称分子量限制（NMWL）/ 核酸截留分子量（NCO）• 截留 • 浓差极化 • 通量
外泌体用于细胞学或动物实验前的无菌处理 已经经过上述方法制备的外泌体在进行细胞或动物实验之前还需进行一步除菌过滤，这个时候考虑到得率，应该采用离心法处理，以减少过滤时的外泌体样品损失。 超滤方法纯化具体操作步骤举例 Amicon® Ultra-15 超滤管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip®真空抽滤对样品进行澄清[目录号SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon® Ultra-15 超滤管(目录号UFC901024,10 kDa MWCO) ，4000g离心 X 10 min。 从超滤管内管及收集管吸走PBS。向超滤管加入15 mL 样品。4000g 离心30 min 浓缩。倒空收集管。加入14 mL PBS 进行缓冲液置换，温柔吸打样品数次。4000g离心 30 min。从浓缩管吸回处理好的样品。(30X 浓缩) 注意 : 所有 Amicon® Ultra 超滤管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 与此操作流程兼容 *上海超滤浓缩管哪家比较专业。
加入漂洗缓冲液（体积是树脂柱床体积的7.5倍）并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。 4. 使用一个新的50 mL离心管作为收集管。 5. 加入洗脱缓冲液（体积是树脂柱床体积的5倍）与树脂混匀并离心。< 500μL树脂时1,000×g离心1 min；≥ 500μL树脂时2,000×g离心4 min。回收管中即纯化好的蛋白。 6. 如果是纯化抗体，在纯化产物中加入中和缓冲液。 * 进行较大体积操作时，可以延长结合反应时间，并用胶带密封上样池上沿以便颠倒混匀操作。离心前去除胶带即可。选购不带Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管的Amicon® Pro时请使用目录号ACS500024。上海超滤浓缩管销售公司电话多少？徐汇区默克离心浓缩管销售
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用于搅拌式超滤杯的Ultracel®预切超滤膜片 Ultracel® 再生纤维素膜可以用来对较为稀释的溶液进行脱盐或浓缩。Ultracel® 膜是亲水性的，微观结构紧密，确保对蛋白、核酸等大分子吸附比较低而回收率比较高。 *膜的常规截留分子量分为1, 3, 5, 10, 30及 100 kDa等。 *膜片直径分为25, 44.5, 47, 63.5, 76, 90及150 mm。 对于大体积、高浓度（如蛋白浓度大于 1.0 mg/mL）的样品进行脱盐和浓缩，Biomax®聚苯醚砜（PES）超滤膜是很好的选择。血清、血浆或条件组织培养基等，都是 Biomax®超滤膜适合处理的样品。 *膜的常规截留分子量为5,10,30, 50, 100, 300和500kDa等。 *膜直径分为25,44.5,47,63.5和76mm。杨浦区默克2ml超滤浓缩管联系人
