常见检测细胞： **细胞（MDA-MB-231, MCF-7, HT1080, B16F10）等，用孔径为8μm的培养小室巨噬细胞、单核细胞 PMN：用孔径为5μm的培养小室内皮细胞（HUVEC）、白血病细胞 K562、骨髓瘤细胞HB124：用孔径为 3μm或5μm的培养小室 具体操作： 以配合24孔板的8μm PET膜Millicell®悬挂式细胞培养小室（cat#MCEP24H48）为例，实验周期：3-5天 复苏代数靠前的**细胞，在含有10%FBS的培养基中预先培养2-3代，待细胞汇合达到80%左右，饥饿处理18-24小时。 准备铺胶： a) 4 °C融EMC胶过夜。 b) 将细胞小室、培养板和***头等于4°C 预冷。上海益启生物的培养基询价公司电话。金山区血清细胞培养销售
c ) 用无血清的冷培养基稀释ECM 胶至2 0 µ g/mL ，以5-10µg/cm2的密度加入到细胞小室的上层（按照ECM产品说明书的推荐比例和体积），轻轻摇晃使胶均匀铺在膜上。以上操 作在冰上进行。 d)立即将铺好ECM胶的细胞小室置于培养板中，于37°C孵育1小时，ECM胶可由液体凝成固体，吸走多余的或者未凝的胶。细胞用PBS清洗一次，EDTA或者0.05%胰酶消化，然后用包含5%BSA的无血清培养基中和，1500rpm离心5-10min。用无血清培养基重悬细胞，调整细胞密度至0.5-2.0x106cell/ml。崇明区细胞培养细胞培养哪家好上海益启生物的细胞转染询价公司电话。
插入式培养小室为单个无菌包装形式，方便好用，减少浪费 Millicell® 悬挂式细胞培养小室 • 用于细胞共培养、渗透性试验及频繁的杜立操作 • 独特的设计使上下两侧操作都非常方便，减少对细胞的损害和污染 • 全部为PET膜材质，有5种膜孔径和3种膜面积（适合不同多孔板）的产 品供选择；其中1μm孔径的是透明的，特别推荐用于光学观察 Millicell® 站立式细胞培养小室 • 细胞生长状态较好，多种选择使各种细胞学研究极为方便 • 膜材质包括Biopore™(PTFE)膜，MF-Millipore™（混合纤维素酯）膜，聚碳酸酯膜等，有5种膜孔径、2种膜面积供选择（适合6孔板和24孔板）
独特设计，易于使用 不同品牌的插入式细胞培养小窒可能看起来都较为类似，但Merck Millipore产品融合了许多独特的设计能使您的工作更简便。 产品种类齐全，更多选择 您可以根据研究要求，选择**合适的膜材质及产品类别。我们既提供悬挂式和站立式的单孔插入式细胞培养小空，也有24孔或96孔的插入式细胞培养板。 膜的种类 Biopore 膜（亲水性PTFE* 低蛋白吸附、可进行活细胞观察以及免疫荧光的应用Biopore相对于其它膜材质，在用于荧光染色时，具有较低的背景或者无背景。而且其良好的透明度利于对活细胞的观察。经优化，可用于低蛋白结合和低荧光的应用。上海益启生物添加剂订购方便。
BioporefPTFE)膜有助于提高细胞的存活力，**长超过40天；膜的透氧性及透光性也非常出色，推荐用于长期组织结构研究等有挑战性的应用。 主要优点 •经优化的膜确保获得可靠的单层细胞结构 •透明膜易于观察和监控细胞生长 •为各种培养和细胞水平研究制造了各种方便的产品形式 规格 Millicell®站立式细胞培养小室 Millicell® 和MultiScreen® 多孔板 膜质培养表面塑料多孔板根据其膜材质、膜孔径及培养孔的数量分为很多产品。我们的Millicell® 培养板其顶部、底部及侧面的特殊设计及垫高的 边角都使它更适合Caco-2细胞培养。Millicell®细胞培养板对于获得和维持单层细胞效果很好。益启生物公司带您了解培养小室详情。闵行区细胞培养代理价
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取上述200μL细胞液加入小室，下室（培养板）加入900L含有10% FBS的培养基。不同规格的小室和培养板所加的体积不同，具体参考Millicell®产品说明书。37°C孵育24至72小时，依据**细胞类型而定。孵育结束，小心取出细胞小室，吸掉小室上层培养液，PBS清洗一遍，70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min，0.5%结晶紫（2%乙醇或PBS溶解）染色20min，然后进行第8步或者第9步。PBS清洗两次以去除多余的染料，立即用棉签擦去滤膜上层的细胞，自然静置风干。显微镜下观察滤膜下层的细胞，随机选取不同的视野计数并算平均值。结晶紫溶解滤膜下层细胞，然后用33%醋酸脱色，将结晶紫完全洗脱下来，洗脱液可在酶标仪上570nm读取OD值。这种方法可以避免视野下细胞穿透不均匀带来的误差。金山区血清细胞培养销售
