CAS培养基,也称为ChromeAzurolS(CAS)检测培养基,主要用于检测微生物是否产生铁载体(siderophore)。铁载体是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质,对于微生物在缺铁环境中的生长至关重要。CAS培养基的特点主要包括:1.**成分**:CAS培养基包含铬天青S(CAS)、十六烷基三甲基溴化铵(HDTMA)、铁离子等成分,这些成分与微生物分泌的铁载体反应,产生颜色变化,从而可以判断微生物是否产生铁载体。此外,培养基中还包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、氯化钙等,提供微生物生长所需的碳源、氮源和其他生长因子。2.**颜色变化**:当微生物产生的铁载体与CAS培养基中的复合物结合后,会夺走铁离子,使培养基颜色由蓝色变为橘黄色,出现铁载体分泌圈,这有助于判断细菌是否产生铁载体。3.**pH值**:CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1(25℃),以保证微生物的生长和铁载体的活性。4.**配制方法**:CAS培养基的配制方法相对复杂,但一些产品如Coolaber改良的CAS琼脂培养基已经进行了改良,减少了实验准备时间。该产品分为培养基基础、已灭菌的缓冲剂和已灭菌的CAS检测液三个部分,使用时只需将这些组分按说明混合即可。BCPA 培养基的酸碱度经过精确调整,为微生物提供了适宜的生长环境。Hoyle培养基基础
脑心浸出液肉汤(BrainHeartInfusionBroth,简称BHI)是一种使用的微生物培养基,其特点如下:1.**营养丰富**:BHI培养基含有牛心浸粉、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和磷酸氢二钠等成分,为多种微生物提供碳源、氮源、维生素和生长因子。这种培养基特别适合培养苛养型致病微生物,如链球菌、脑膜炎球菌、肺炎球菌等。2.**pH稳定**:BHI培养基的pH值通常控制在7.4±0.2(25℃),这为微生物的生长提供了适宜的酸碱环境。3.**非选择性**:BHI培养基是非选择性的,意味着它能够支持细菌、霉菌和酵母菌等多种微生物的生长。4.**应用广**:BHI培养基可用于从临床标本中进行需氧细菌的初步分离,也可用于培养单增李斯特菌、葡萄球菌等,以及进行血浆凝固酶试验和药敏实验。5.**制备方法**:将BHI培养基的干粉加入到蒸馏水中,加热煮沸以完全溶解,然后在121°C条件下高压蒸汽灭菌15分钟。6.**储存条件**:BHI培养基通常在避光、干燥的条件下保存,未开封的保质期可达三年。7.**质量控制**:使用特定的质控菌株进行生长测试,确保培养基的质量符合标准,如粪肠球菌ATCC29212、金黄色葡萄球菌ATCC6538等。硫酸盐还原菌培养基D硝酸盐肉汤用于蜡样芽孢杆菌硝酸盐还原试验,也适用于其他细菌的硝酸盐还原能力测试,如肠杆菌科。
除了DRBC培养基,适合霉菌分离的培养基还包括:1.**马铃薯葡萄糖琼脂(PotatoDextroseAgar,PDA)**:这是一种常用的培养基,适用于多种霉菌的生长,是霉菌实验室检验的标准培养基之一。2.**孟加拉红琼脂(RoseBengalAgar)**:含有孟加拉红染料,可以抑制细菌的生长,同时促进霉菌的生长,特别适用于酵母和霉菌的分离。3.**高盐察氏培养基(HighSaltCzapek'sAgar)**:适用于耐高盐环境霉菌的分离和计数,常用于食品中霉菌总数的测定。4.**氯硝胺18%甘油培养基(DG18)**:在研究中发现,这种培养基对黄曲霉的分离效果很好,能够抑制毛霉的生长。5.**YES培养基**:用于培养酵母和霉菌,具有较好的分离效果。6.**沙氏葡萄糖琼脂(SabouraudDextroseAgar,SDA)**:中国药典推荐的霉菌计数培养基,常用于霉菌和酵母的计数。7.**霉菌培养基(含琼脂和氯霉素)**:这种培养基含有氯霉素,可以抑制细菌的生长,同时促进霉菌的生长。每种培养基都有其特定的应用场景和优势,选择合适的培养基可以根据霉菌的类型和检验目的来确定。
DRBC培养基(Dichloran-RoseBengalChloramphenicolAgar)是一种用于酵母和霉菌分离培养的培养基。它特别适用于食品中霉菌和酵母菌的计数和分离。**DRBC培养基的基本成分**包括:-酶水解动植物组织:5.0g/L-葡萄糖:10.0g/L-磷酸二氢钾:1.0g/L-硫酸镁:0.5g/L-氯硝铵:0.002g/L-虎红钠盐:0.025g/L-氯霉素:0.1g/L-琼脂:15.0g/L**pH值**通常控制在5.6±0.2(25℃)。**配制方法**一般是:1.称取31.6克DRBC培养基干粉。2.加入1升蒸馏水或纯化水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.121℃高压灭菌15分钟后备用。**使用方法**:-将灭菌后的培养基冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中。-接种样品后,在25±1℃下进行培养。**培养结果**:-酵母菌和霉菌在DRBC培养基上会形成粉红色的菌落。-大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等细菌在该培养基上会被抑制。**储存条件**:-应在避光、干燥处储存。-保质期通常为三年。**质量控制**:-酿酒酵母ATCC9763在DRBC培养基上生长良好,形成粉红色菌落。-大肠埃希氏菌ATCC25922和枯草芽孢杆菌ATCC6633在该培养基上应被抑制。DRBC培养基是按照ISO21527-1标准生产的,适用于食品和动物饲料中酵母和霉菌的计数。LB琼脂(Miller)是一种用于细菌培养的培养基,特别适合于大肠杆菌(E. coli)等革兰氏阴性菌的培养。
匹克氏肉汤基础A是一种用于溶血性链球菌选择性增菌培养的培养基。它的主要成分包括胰蛋白胨、牛心浸粉、叠氮钠和结晶紫,这些成分为溶血性链球菌提供所需的碳氮源、维生素、生长因子以及选择性抑菌剂。具体的配方为:胰蛋白胨10.0克/升,牛心浸粉20.0克/升,叠氮钠0.065克/升,结晶紫0.002克/升,pH值在7.3-7.5之间(25℃时)。制备方法如下:首先称取30.0克的匹克氏肉汤基础A,加热溶于1000毫升的蒸馏水中,分装后在121℃下高压灭菌15分钟。灭菌后冷却至大约50℃,然后加入脱纤维羊血,混匀备用。这种培养基的使用可以帮助实验室人员在微生物学研究和诊断中更有效地培养和识别溶血性链球菌。TSI 培养基可根据细菌的不同反应特征,有效区分大肠埃希氏菌、沙门菌属等常见肠道菌。Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂)
对细菌的糖发酵能力和硫化氢产生能力进行测试,这是 TSI 培养基的重要作用。Hoyle培养基基础
PYG培养基是一种专门用于双歧杆菌增菌培养的培养基,其特点主要包括:1.**成分**:PYG培养基的主要成分包括蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、半胱氨酸盐酸盐、氯化钙、硫酸镁、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾和碳酸氢钠。这些成分为双歧杆菌提供氮源、维生素、生长因子以及必要的缓冲剂。2.**pH值**:PYG培养基的pH值通常控制在6.0±0.1(25℃),以保证双歧杆菌的生长环境。3.**厌氧条件**:由于双歧杆菌是厌氧菌,PYG培养基需要在厌氧或微需氧条件下使用,以确保细菌的正常生长。4.**添加物**:为了促进双歧杆菌的生长,PYG培养基在使用时还需添加维生素K1和氯化血红素,这些添加剂提供了双歧杆菌生长所需的额外生长因子。5.**配制方法**:通常需要称取一定量的PYG培养基干粉,溶解在蒸馏水中,经过高压灭菌后,冷却至适当温度,再加入过滤除菌的维生素K1溶液和氯化血红素溶液,混匀后使用。6.**质量控制**:PYG培养基的质量控制包括对质控菌株的生长情况进行观察,以确保培养基的效果。例如,长双歧杆菌和婴儿双歧杆菌在PYG培养基上的生长情况通常表现为圆形凸起,奶油色,边缘整齐光滑的菌落。Hoyle培养基基础