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深圳ChIP免疫沉淀磁珠多少钱

免疫沉淀IP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μ...

免疫沉淀基本参数

品牌
世途科生物
产品名称
免疫沉淀磁珠Protein A/G
有效期
12个月

免疫沉淀企业商机

免疫沉淀IP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。

琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ，它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构，这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触，具有更高的结合载量。

与琼脂糖珠不同，磁珠是固体，抗体的结合限于磁珠的表面。磁珠 (直径 1-4 μm) 明显小于琼脂糖珠，尽管磁珠没有多孔中心增加结合能力，但每体积的磁珠数量比琼脂糖珠多，使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合。

简而言之，琼脂糖珠的结合能力较强，而磁珠在得率，可重复性以及自动化方面有明显的优势。

免疫沉淀技术的实验设计。深圳ChIP免疫沉淀磁珠多少钱

免疫沉淀实验步骤：

1. 样品制备

a. 悬浮细胞样品处理：离心收集细胞（4℃, 1000g, 5 min），用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250 μL裂解液的比例加入含蛋白酶抑制剂的裂解液（裂解液应在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂Cocktail，使蛋白酶抑制剂Cocktail的终浓度为1×）。混匀后置于冰上处理10 min；离心收集上清液（4℃, 14000g, 10 min），置于冰上备用（或置于-20℃长期保存）。

b. 贴壁细胞样品处理：移去培养基，用PBS清洗细胞两遍；用细胞刮棒刮脱细胞，收集至1.5mL EP管内，按照6孔板每孔加入150-250 μL裂解液的比例加入含蛋白酶抑制剂的裂解液（裂解液应在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂Cocktail，使蛋白酶抑制剂Cocktail的终浓度为1×）。吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。混匀后置于冰上处理10 min；离心收集上清液（4℃, 14000g, 10 min），置于冰上备用（或置于-20℃长期保存）。

4. 后续：磁珠预处理——抗体吸附——抗原结合反应——抗体洗脱

苏州ChIP免疫沉淀磁珠多少钱免疫沉淀的原理是什么？

免疫沉淀技术RIP（RNA Immunoprecipitation，RNA免疫沉淀）的实验方法基于以下几个关键步骤：

1. 细胞裂解：首先，细胞或组织样本被裂解，以释放细胞内的蛋白质和RNA复合物。

2.抗体特异性结合：裂解后的样本中加入针对特定RNA结合蛋白的抗体。这些抗体能够特异性地识别并结合到目标蛋白。

3. 免疫复合物形成：抗体与目标蛋白结合后，形成抗体-蛋白质-RNA复合物。

4. 亲和介质捕获：使用蛋白A或蛋白G结合的珠子（如琼脂糖或磁性珠子）来捕获这些抗体-蛋白质-RNA复合物。蛋白A或蛋白G能够与抗体的Fc部分结合，从而拉下与之结合的复合物。

5. 洗涤：捕获的复合物被洗涤以去除未特异性结合的蛋白质和RNA。

6. RNA分离和分析：从珠子上洗脱或消化复合物，分离出RNA，并进行进一步的分析，如qPCR、Northern blot或高通量测序（RNA-Seq）。

免疫沉淀实验不同于WB实验的样品制备，对实验样品制备要求更高，除了要控制所有操作尽量在冰上完成外，关键的是裂解液的成分，裂解液成分直接决定了样品质量。

主要影响：

1. 蛋白的释放：许多目的蛋白定位在细胞器，质膜，细胞核，细胞骨架中，但通常这些亚细胞结构很难被裂解液有效溶解，所以很难将这些蛋白释放出来。

2. 蛋白相互作用：不同去垢剂对不同性质的蛋白质间相互作用影响程度不同，一些互作较弱的蛋白对尽管在比较温和的裂解液配方中仍然会被破坏。

免疫沉淀技术Co-IP的原理是什么？

RNA免疫沉淀技术（RIP）是一种研究RNA与蛋白质相互作用的重要方法，其应用领域主要包括：

1. 转录后调控研究：RIP技术可以帮助研究者了解RNA在转录后水平如何被调控。

2. 表观遗传调控：RIP技术用于研究RNA结合蛋白（RBPs）在表观遗传调控中的作用。

3. 非编码RNA功能研究：RIP技术可以用来研究长非编码RNA（lncRNA）、miRNA和其他小RNA的种类，以及它们如何与蛋白质相互作用来调控基因表达。

4. RNA病毒研究：RIP技术也可用于研究RNA病毒与其宿主细胞内蛋白质的相互作用，进而了解病毒复制和致病机制。

5. RNA修饰和甲基化研究：RIP技术结合其他技术如m5C-RIP-seq，可用于研究RNA甲基化修饰及其在病理过程中的作用。

6. RNA定位和稳定性：通过RIP技术，研究者可以探索特定RNA在细胞内的定位以及它们如何被稳定或降解。

7. RNA-蛋白质复合物的鉴定：RIP技术可以用来鉴定与特定RNA结合的蛋白质，从而揭示RNA-蛋白质复合物的组成。

8. 疾病相关RNA研究：RIP技术在疾病相关RNA的研究中也有应用。

免疫沉淀技术IP的原理是什么？苏州RIP免疫沉淀磁珠原理

免疫沉淀技术RIP是什么？深圳ChIP免疫沉淀磁珠多少钱

免疫沉淀是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后，再与蛋白A/G（ProteinA/G）或二抗偶联的珠子（agarose或Sepharose）孵育，通过离心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物，沉淀经过洗涤后，重悬于电泳上样缓冲液，煮沸5-10min，在高温及还原剂的作用下，抗原与抗体解离，离心收集上清，上清中包括抗体、目的蛋白和少量的杂蛋白。免疫沉淀是一种生物学技术，它利用抗体的特异性结合特性来富集和分离混合物中的特定蛋白质。这种技术是研究蛋白质表达、蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质修饰和蛋白质功能的强大工具。深圳ChIP免疫沉淀磁珠多少钱

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