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IdeS蛋白酶基本参数
  • 品牌
  • Genovis
  • 型号
  • A0-FR8-020等
  • 货号
  • A0-FR8-020
  • 中文描述
  • FabRICATOR
  • 规格
  • 2000U/5000U等
  • 级别
  • 研发级
  • 应用领域
  • 抗体酶切、抗体去糖基化、抗体偶联、蛋白质组学、聚糖图谱、亲和
IdeS蛋白酶企业商机

其他基于 IgG 的生物制药需要仔细表征和监测关键质量属性,例如氧化、糖基化和其他翻译后修饰。与抗体的克隆选择、工艺开发和稳定性研究相关的大量样品通常通过液相色谱质谱 (LC-MS) 进行分析。然而,在LC-MS之前进行足够规模的样品制备通常具有挑战性。为了解决样品制备的挑战,Genovis将半胱氨酸蛋白酶FabRICATOR(IdeS)固定在磁性琼脂糖珠上,现在称为FabRICATOR MagIC。FabRICATOR固定在磁珠上,可同时快速自动消化多种抗体,促进中级表征工作流程。Genovis的FabRICATOR MagIC 如何以较少的用户交互减少实验和操作时间,降低样品处理错误的风险,同时提高通量。可以用Genovis的GlySERIAS固定化酶(琼脂糖珠共价偶联)消化度拉糖肽。江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶

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为什么客户想在他们的工作试用Genovis的FabRICATOR(IdeS)。FabRICATOR的高特异性(在铰链下方有单个消化位点)以及它对IgG种和亚类表现出活性的事实使其成为高效表征一系列不同分子的理想工具。FabRICATOR的另一大优势是速度。在大多数IgG上,您可以在短短30分钟内生成F(ab’)2和Fc/2片段,这一速度简化了方法开发,并允许快速有效的中层表征,使客户能够在不比做完整质量实验长太多的时间内获得更多关于分子的信息。Genovis发现更多的缓冲液与溶液中的FabRICATOR消解相容(更多信息)。Genovis已经测试了PBS和150mM醋酸铵,pH7,结果良好。并且应该也适用于FabRICATORHPLC。然而,缓冲液的离子强度会影响抗体片段在FabRICATORHPLC(IdeS)色谱柱上的保留,并且IgG1亚基需要至少100-150mM盐才能洗脱为单个窄峰。其他IgG亚类或融合蛋白可能需要对缓冲液组成进行一些优化。吉林GingisKHANIdeS蛋白酶抗体酶切与 FabRICATOR 相比,FabRICATOR Z 在消化这些 IgG 方面具有更高的效率。

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用于IgA1和IgA2m1以上铰链消化的冻干酶。与IdeS不同,Genovis提供的IgASAPSub1+2在铰链上方的一个特定位点消化人IgA1和IgA2m1,产生完整且均匀的Fab和Fc片段。由于人IgA1的铰链比IgA2的铰链长,因此IgA1和IgA2m1之间来自消化位点的氨基酸C末端不同。IgASAPSub1+2可消化分泌物和血清IgA。孵育时间为过夜(16-18小时),并且由于酶的特异性,没有过度消化的风险。该酶在pH值为6.0至8.0时具有活性,不需要还原条件或辅助因子即可产生活性。活性为37°C。IgASAPSub1+2是从丹毒梭菌克隆而来的,并在大肠杆菌中表达。该酶含有His标签,分子量为131kDa。IgASAPSub1+2冻干剂以冻干粉的形式提供,装在1000个单位的小瓶中,用于消化1mgIgA1和IgA2m1。

作为免疫系统的重要组成部分,IgA在自身免疫性疾病、过敏反应、胃肠道疾病等许多不同的健康状况中发挥作用。在天然条件和复杂生物样品中选择性和特异性消化IgA的能力在临床医学和研究中具有重要价值。IgASAP酶是降低zhiliao性IgA候选物样品复杂性并简化IgA分析表征的宝贵工具。人IgA1和IgA2之间的一个显着结构差异是铰链区域。与IgA2相比,IgA1具有更长的富含O-聚糖且更灵活的铰链区域。IgASAPSub1的消化位点位于该扩展区域,使酶具有IgA1特异性。IgA2亚类以三种等位基因形式存在,A2m1、A2m2和A2m3。IgASAPSub1+2在脯氨酸(P)和缬氨酸(V)之间消化IgA1和IgA2m1只有N端到铰链区域,但由于A2m2和A2m3中的脯氨酸残基被精氨酸(R)残基取代,因此这两种同种异体型的IgA2对消化具有抗性。有效消化,适用于灵敏的体内或基于细胞的检测。

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Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一种独特的酶,可在铰链区域下方的特定位点消化IgG,产生均匀的F(ab')2和Fc/2片段。除IgG外,没有其他底物是已知的。IgG在30分钟内消化,如果孵育时间延长,则不存在过度消化的风险。由于FabRICATOR在生理反应条件下消化IgG,因此保留了免疫反应性。在37°C下获得良好的活性,但也可以在室温下使用较长的反应时间进行消解。FabRICATOR可消化人类的所有亚类以及猴子、兔子和绵羊IgG的某些亚类。它对小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-为了消化这些抗体物种,我们建议使用FabRICATORZ。FabRICATOR是从化脓性链球菌克隆而来的,并在大肠杆菌中表达。该酶含有His标签,分子量为37725Da。FabRICATOR是IdeS的重组修饰形式,由GenovisAB开发,用于需要高标准和一致性的生物技术应用。有一种检测FabRICATOR酶的方法。了解有关山羊多克隆抗体Anti-FabRICATOR的更多信息。自动抗体亚基分析可减少操作人员的时间和样品处理错误的风险,并提高通量。重庆FabDELLOIdeS蛋白酶

木瓜蛋白酶和 Lys-C 等传统酶可用于生成 Fab 片段,但非特异性酶活性需要仔细优化,降低多个消化位点的风险。江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶

与IdeS不同,Genovis的GingisKHAN(Kgp)是一种半胱氨酸蛋白酶,可在铰链上方的单个位点(KSCDK/THTCPPC)消化人IgG1,产生完整且均质的Fab和Fc片段。GingisKHAN是一种赖氨酸特异性蛋白酶。单一的消化位点是人IgG1三维结构的结果,使这种赖氨酸暴露于酶中。如果去除N-聚糖,则Fc上暴露的赖氨酸处可能会出现额外的消化位点。GingisKHAN需要温和的还原条件才能具有活性,并且在37°C和pH8下获得活性。还原剂(2mM半胱氨酸)与酶一起提供。GingisKHAN是从牙龈卟啉单胞菌中纯化的。该酶用于使用LC-MS表征基于抗体的生物zhiliao药物,研究Fc聚糖分析、双特异性抗体、亲和力和亲和力效应,并鉴定翻译后修饰。江西FabALACTICAIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶

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