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苏州Protein AG免疫沉淀磁珠现货

免疫沉淀Co-IP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-15...

免疫沉淀基本参数

品牌
世途科生物
产品名称
免疫沉淀磁珠Protein A/G
有效期
12个月

免疫沉淀企业商机

免疫沉淀Co-IP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。

琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ，它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构，这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触，具有更高的结合载量。

与琼脂糖珠不同，磁珠是固体，抗体的结合限于磁珠的表面。磁珠 (直径 1-4 μm) 明显小于琼脂糖珠，尽管磁珠没有多孔中心增加结合能力，但每体积的磁珠数量比琼脂糖珠多，使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合。

简而言之，琼脂糖珠的结合能力较强，而磁珠在得率，可重复性以及自动化方面有明显的优势。

免疫沉淀技术Co-IP的优缺点是什么？苏州Protein AG免疫沉淀磁珠现货

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation，简称IP）是一种生物化学方法，它利用特异性抗体对抗原进行亲和纯化。在含有目的抗原的细胞裂解液中加入特定的抗体以及Protein A/G-Beads（预先将Protein A/G固定结合在磁珠上），根据抗原与抗体、Protein A/G与抗体的Fc的特异性，形成“抗原-抗体-Protein A/G-Beads”复合物，清洗离心后去除溶液中未结合的杂蛋白，检测是否存在目的蛋白。

免疫沉淀技术常用于从细胞或组织裂解物中分离用于免疫印迹检测或其他检测技术的蛋白和其他生物分子。它的目标是分离足够用于Western Blot或其他检测方法检测的蛋白质。

苏州Protein AG免疫沉淀磁珠现货免疫沉淀技术IP的原理是什么？

免疫沉淀纯化所得抗原纯度低一般有多种原因：

1. 非特异性蛋白污染

如果洗脱所得抗原纯度较低，则有几种方法可以进行优化。在结合或洗涤缓冲液中加入去污剂或其他可以降低非特异性结合的组分。使用普通微珠预纯化样本还可以降低非目标分子的共纯化。此外，还可以使用无关蛋白 (如BSA) 封闭微珠。

2. 抗体污染

使用蛋白A、G或A/G的经典免疫沉淀实验中会出现抗体与抗原共洗脱的情况。如果共洗脱会影响下游分析，则需要使用抗体通过共价连接固定至微珠的方法进行实验，如Pierce 直接 IP 或交联 IP 的形式。

RIP实验步骤通常包括：

1. 细胞收集与交联：培养细胞至适当密度。使用交联剂（如甲醛）进行交联，以固定蛋白质-RNA复合物。

2. 细胞裂解：收集细胞并进行裂解，释放RNA-蛋白质复合物。在裂解过程中添加蛋白酶抑制剂以防止蛋白质降解。

3. 超声处理：使用超声波破坏细胞，获得更小的染色质片段，这有助于后续步骤中抗体的接触。

4. 除去细胞碎片：通过离心去除细胞碎片和未裂解的细胞，收集含RNA-蛋白质复合物的上清液。

5. 免疫沉淀：将针对特定RNA结合蛋白（RBP）的抗体加入到上清液中。孵育一段时间，使抗体与目标蛋白充分结合。

6. 捕获免疫复合物：添加蛋白A或蛋白G结合的磁珠或琼脂糖珠。孵育使抗体-蛋白质-RNA复合物与珠子结合。

7. 洗涤：多次洗涤珠子以去除未特异性结合的蛋白质和RNA。

8. 洗脱与逆转交联：使用适当的缓冲液洗脱免疫复合物。使用蛋白酶K处理样品以逆转交联，释放RNA。

9. RNA提取与纯化：从免疫沉淀样品中提取RNA，并进行纯化。

10. RNA分析：使用qPCR、Northern blot、RNA-Seq等方法分析沉淀的RNA，以确定与目标蛋白相互作用的RNA种类。

免疫沉淀样本的制备。

免疫共沉淀分析（Co-IP）与IP十分类似，基本的技术都是采用目标抗原特异性的固相化抗体；但IP的目标是纯化单一抗原，而Co-IP旨在分离抗原及与抗原结合的蛋白质或配体。

在Co-IP实验中，已知抗原称为诱饵蛋白，与之结合的蛋白则称为靶蛋白。靶蛋白可能是一些复杂的伴侣蛋白、信号分子、结构蛋白、辅助因子等，蛋白间相互作用强度范围可能介于高度瞬时和十分稳定之间。

基本的Co-IP实验方案与IP相同，实际上任何IP系统均可用于Co-IP。但是，还有许多其他因素需要考虑，例如，结合和洗涤条件的优化，优化时，需要考虑到诱饵蛋白-靶蛋白的相互作用强度以及抗体-诱饵蛋白的亲和力。

免疫沉淀技术ChIP的优缺点是什么？温州蛋白免疫沉淀技术服务

免疫沉淀技术RIP的实验设计。苏州Protein AG免疫沉淀磁珠现货

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation，简称IP）是一种生物学实验方法，用于从细胞或组织裂解物中分离和纯化特定蛋白质。这项技术依赖于抗体的高度特异性，通过抗体与目标蛋白质的结合，实现对目标蛋白质的富集和纯化。

具体操作步骤通常包括以下几个阶段：裂解细胞或组织，抗体与蛋白质结合，固相支持物的使用，免疫复合物的捕获，洗涤，洗脱分析。

免疫沉淀技术不仅可以用于检测蛋白质的存在和量，还可以用于研究蛋白质的翻译后修饰、蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质稳定性以及蛋白质的功能等。此外，免疫沉淀技术是许多其他高级实验技术的基础，如染色质免疫沉淀测序（ChIP-Seq）和蛋白质相互作用网络分析等。

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