不同的研究目的需要不同种类的培养基。例如,对于细胞的生化实验,需要使用无血清(serum-free)培养基,以避免血清中对实验结果造成的干扰;而在进行免疫细胞培养时,需要使用低血清(low-serum)培养基,以保证免疫活性。此外,在一些特定的研究领域中,需要使用小份量培养基、无菌培养基或其他特殊处理的培养基。实验室的环境也会对培养基的选择产生影响。例如,高温、高湿度或高气压等极端环境下,需要选择相应的抗旱、抗热或抗氧化的培养基,以确保实验的成功。此外,在空气中存在大量的微生物和气溶胶时,为避免微生物的污染,需要使用低菌量的培养基或实验室级别的干扰者。培养基的传递需要在制备和使用期间保持良好的无菌技术,避免细菌交叉污染。V-P半固体琼脂(VP)
干粉培养基是指干燥形态的培养基,通常需要加入适量的水或其他溶液以制成使用液体。干粉培养基通常包括可溶性和不溶性成分两种。其中可溶性成分为微生物和细菌等生物的生长提供必要的营养,而不溶性成分则为细胞提供支撑和保护作用。常见的干粉培养基包括TrypticSoyBroth(TSB)培养基、LB培养基、NutrientBroth(NB)培养基等。这些培养基通常需要在pH7.0-7.4之间保持稳定的酸碱度,并在适宜的温度和湿度下保存以确保培养基的质量。液体培养基通常是以水为基础配制而成的,或加入适量的薄荷醇等物质以调节酸碱度和渗透压等。与干粉培养基不同的是,液体培养基通常较少使用不溶性物质,而是依赖于水的流动性和原生质体膜的稳定性。液体培养基制备起来相对容易,且通常不需要使用过多的手段和工具即可获得较好的培养基。常见的液体培养基包括TSB液体培养基、LB液体培养基、Hanks培养基等。5%半胱氨酸盐酸盐溶液(MRS-半胱氨酸盐酸盐培养基添加剂)有些细胞需要在低温下培养,这时需要特殊的培养基。
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。
对于已经购买来的预装培养基,其内部较初的状态已经是无菌的。因此,在通常情况下,我们不需要对新的预装培养基进行任何形式的消毒处理。只需要在使用之前,检查预装培养基瓶口是否无菌,便可以直接使用。在使用过程中,应当严格遵守实验室操作规范,避免外界微生物的污染。对于需要自制的培养基而言,其情况也不尽相同。如果自制的培养基中包含天然成分,那么在自制之后就需要进行消毒处理,以杀死培养基中可能存在的微生物。在消毒处理之后,再将培养基装入瓶中,就可以进行进一步的实验使用。同时,在使用自制的预装培养基时,需要严格控制其培养温度、培养时间、以及实验环境等参数,以保证实验结果的准确性。半固态培养基是一种介于液态培养基和固体培养基之间的混合形式,常用于筛选微生物菌株。
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在维生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中碳源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与维生素的合成协调。不同种类的液体培养基具有不同的营养成分和试剂配方,它们可用于不同类型的细胞和微生物培养。强化梭菌鉴别琼脂(DRCA)
培养基是用于微生物、细胞、组织等体外培养的营养精制的物质。V-P半固体琼脂(VP)
各种生物具有不同的营养需求和生长特性。在选择培养基时需要了解生物的基本信息,如生长率、形态、特化程度、基因型和病毒负荷等因素。对于不同种类的生物,需要选择适当的培养基,以使其能够生长繁殖,并保持其原始形态和特性。在选择培养基时,一般需要考虑的问题包括生物的饲养密度、培养时间、培养液中浓度的较佳浓度等。不同的实验要求需要不同的培养基。例如,细胞培养和微生物培养需要不同种类的培养基。细胞培养的培养基一般需要提供较高的营养水平和多种生长因子,以支持细胞生长和繁殖;而微生物培养的培养基则需要提供特定的有机物或无机盐类,以保证微生物生长和繁殖的需要。此外,对于一些特定的细胞和微生物,还需要有特殊的培养技术和特定的培养基,以实现对其生长和繁殖的控制。V-P半固体琼脂(VP)