实验室在制作培养基时候的经验总结:1、培养基pH值的调正:pH因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,培养基各成分完全溶解后,应进行pH的初步调正。例如,牛肉浸液约可降低pH0.2,而肠浸液pH却会有明显的升高。因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的较终pH,保证培养基的质量。pH调整后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出。2、培养基过滤澄清:液体培养基必须澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应折叠成折扇或漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。脱水培养基,又称预制干燥培养基,指含有除水分外的一切成分的商品培养基。上海培养基灭菌 培养基制备器
培养基的灭菌:培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、灭菌15min,但容器和装量较大时,应延长至20min。含糖培养基115℃、灭菌30min。含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌。血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、灭菌30min为好。山西培养基制备器供应商培养基制备器微生物细胞组成元素的调查或分析,是设计培养基时的重要参考依据。
配制培养基的原则:调节氧化还原电位(Eh)各种微生物对培养基的Eh要求不同。适宜好氧微生物生长的Eh值一般为+0.3~+0.4V,厌氧微生物只能在+0.1V以下生长,因此,培养好氧微生物必须保证氧的供应,可在培养基中加入氧化剂提高Eh值。调节渗透压多数微生物能耐受较大范围渗透压的变化。培养基中营养物质的浓度过大,会使渗透压过高,使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。低渗溶液则使细胞吸水膨胀易破裂,因此,配制培养基时要掌握营养物质的浓度。常在培养基中加人适量的Nacl以提高渗透压。原料来源的选择力求节约:配制培养基还应遵循力求节约的原则,尽量选用价格便宜、来源方便的原料。特别是在工业发酵中,培养基用量大,更应注意利用低成本的原料,降低产品成本。
培养基制备基本方法:培养基各成份的混合和溶化,培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。很好使用不锈钢锅加热溶化,也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动,以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如为琼脂培养基,应先用一部分水将琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,必须加以补足。培养基制备器利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。
天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。例如。牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基和LB培养基等。常用的天然有机营养物质包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麸皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培养基成本较低,除在实验室经常使用外,也适于用来进行工业上大规模的微生物发酵生产。组合培养基合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计而配制的培养基。例如,高氏1号培养基和查氏培养基等。合成培养基有一定的配方,配制合成培养基时重复性强,但与天然培养基相比其成本较高,微生物在其中生长速度较慢,一般适于在实验室用来进行有关微生物营养需求、代谢、分类鉴定、生物量测定、菌种选育及遗传分析等方面的研究工作。半组合培养基指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。培养基根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、培养基等。陕西全自动培养基制备器
培养基制备器分装好的培养基应立即进行灭菌。上海培养基灭菌 培养基制备器
配置培养基注意问题:1、根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。2、注意各种营养物质的浓度及合适配比,保持合适渗透压。3、将培养基的pH控制在适宜的范围之内,以利于不同类型微生物的生长繁殖或代谢产物的积累。4、要注意各种原料的配比,每种培养基的配比合适的配比,可以按照老师的要求去做。5、如需要加热的时候注意时间的把握。培养基,是指供给微生物、植物或动物生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。上海培养基灭菌 培养基制备器
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