在细胞、组织和微生物的培养过程中,pH值的控制非常重要。不同的培养基需要不同的pH范围,以满足生长和发展的需求。pH值是指培养基中氢离子(H+)的浓度,是一个表示溶液酸碱性的指标。pH值的数值越小,表示溶液越酸性。pH值的数值越大,表示溶液越碱性。pH值的中性为7。pH值对细胞和微生物生长和发展有着重要的影响。过高或过低的pH值都会影响生命体的正常生长。pH值的小幅度变化就足以影响酶的活性,从而影响代谢和生长。因此,对于细胞、组织和微生物的研究,必须控制好培养基的pH值。培养基是细胞和微生物生长所需的基本营养物质和环境条件。SOC培养基
生长基(也称为普遍培养基,Nutrient Agar)是较常用的预装培养基之一,由肉汤、酵母提取物和琼脂组成,其中肉汤作为氮源,酵母提取物是有机碳源,琼脂则提供了基础结构。这种培养基适用于大多数微生物的生长,可用于分离和纯化菌落。微生物筛选基涵盖了不同类型的预装培养基,例如:MacConkey Agar、Eosin Methylene Blue Agar(EMB)、Sabouraud Agar等等。这些培养基是为了筛选或区别不同类型的微生物而设计的,比如MacConkey Agar用于筛选革兰氏阴性杆菌,EMB用于筛选带有发酵代谢特征的细菌,而Sabouraud Agar则是用于细菌的培养。特定微生物培养基是为了培养和分离特定微生物而设计的,比如:Thayer Martin Agar是专门用于淋球菌的培养基,Lowenstein Jensen Agar是用于结核分枝杆菌的培养基。因为这些特定微生物通常较为难培养,所以特定的培养基在选择上尤为重要。WL鉴别培养基添加剂培养基是一种用于微生物生长和培养的特殊营养成分。
液体培养基:只含有稀释的琼脂而没有固体成分的培养基称作液体培养基,这类培养基可以是透明的,也可以加入某些蛋白质、胆汁、奶酪素等物质使其呈乳白色。液体培养基的传递作用弱,在其内部微生物可以自由地游走和移动。由于养分的扩散和弥散,微生物生长比较均匀,容易观察和操作。液体培养基适用于下列技术和用途:培养非必需氧气的微生物,便于大规模分离和培养细胞,易于获得菌液。固体培养基:上面介绍的培养基中,添加2-3%琼脂成为了固体培养基。固体培养基结构较坚硬,微生物只能在上面生长,分布和传播相对固定,因此比较有利于观察某些微生物的生长,或对不同微生物胡进行分离。固体培养基适用于下列技术和用途:建立单个菌落,分离微生物混合物,培养土壤样品等。
使用预装培养基前应该检查其有效期,确认其是否过期。如果装在容器中的培养基已经超过了其有效期,即使它看起来没有问题,也不能在实验中使用。因为过期的培养基可能会因为细菌、病毒等微生物侵入而变质,使得实验结果不准确或者完全失败。因此在使用前需要仔细检查有效期。使用预装培养基需要先检查容器的密封性,确认容器是否完好无损,是否密封良好。因为培养基是灵敏的生物制品,如果容器未密封良好,其中的培养基可能会受到外部污染,细菌、霉菌等微生物可能会侵入其中,导致实验结果不准确或失败。所以在使用前要检查容器完整性和密封性。黄色布氏菌芽孢杆菌常用的培养基为营养琼脂平板培养基。
干粉培养基的保存和注意事项:干粉培养基的储存条件应保持干燥、防潮、防晒,并存放于阴凉干燥处,避免受到光线、温度、湿度等外界环境的影响。一旦开封,干粉培养基应立即密封并放回原包装中,以免受到环境中的污染和变质。在使用干粉培养基时,应注意其有效期和使用方法。有效期是指干粉培养基在储存条件下能够保持理想品质的时间,一般为 2 年至数年不等。在该期限内使用的干粉培养基能够保证培养实验的有效性和可重复性。同时,使用干粉培养基时应遵循无菌操作的原则,注意消毒、净化和防止污染,保证实验结果的准确和可靠。某些培养基会在特定环境下产生特定的表型变化,例如MacConkey培养基生成红色菌落表示肠道杆菌的存在。改良高氏二号液体培养基
细菌在培养基中生长,与环境的影响和培养基的质量有很大关系。SOC培养基
预装培养基的保存方法:预装培养基的保存在实验中也是非常重要的一步。由于培养基中含有大量的微生物和营养成分,因此需要进行正确的储存,以确保实验结果的准确和稳定。在保存预装培养基时,一定要注意以下几点:储存的环境一定要干燥、洁净、通风,并且要避免阳光直射。储存温度通常在2℃-8℃之间,在保存时需要进行冷藏处理,避免高温环境下的微生物污染。使用之前需要在无菌操作区域中先将培养基倒入无菌的器皿中,再进行培养实验。除了在储存和使用时需要注意的细节,还有一些其他对预装培养基进行选择和应用的一些要点。在选择预装培养基时,需要根据实验需求选择相应的培养基,比如可以选择差异性培养基、选择性培养基及其它特殊性质的培养基。其次,在使用预装培养基时,需要注意其适用范围,以免出现不必要的实验失败。SOC培养基