金华唐山鼠尾胶原

胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同，每一条亚基形成一股左手旋转的螺旋，其中每3个氨基酸残基形成一圈螺旋。3条左手螺旋再扭在一起形成一个右手大螺旋。这样的螺旋称为3股螺旋。小的甘氨酸残基位于3股螺旋内部。3股螺旋式的棒状胶原分子的大小约是3000×15埃，这些棒状分子首尾相连，并侧向排列形成胶原微丝（其直径可从50埃至数千埃）。胶原分子在两端及沿轴向每隔680埃的距离存在极性区，这些极性区能和重金属离子结合，使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。金华唐山鼠尾胶原

鼠尾胶原是一种天然培养基和一种天然的黏附剂，可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。制备鼠尾胶原方法：1、取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟；2、手持尾巴，用止血钳夹住鼠尾的较高，折断尾骨后拉出尾腱；3、将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡；4、重复步骤2、3，直至尾腱量够用；5、吸去生理盐水，将尾腱称重（0.5-1克）；6、将尾腱置于平皿内剪碎，转移至三角烧瓶中；7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液；8、摇晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；9、离心，4000转/分，10-15分钟；10、吸取上清，分装成小瓶，4℃保存。合肥唐山鼠尾胶原探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效果。

使用方法：1、细胞培养器皿的表面包被：以包被浓度为2μg/cm2为例，用无菌0.006mol/L乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/mL。加到相应的培养器皿中，确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。开盖在超净台上过夜晾干，也可以在室温放置1小时后，用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。2、三维胶原凝胶的制备：A、无细胞三维胶原凝胶的制备（以配制1mg/mL三维胶1mL为例）将200μL本品加到置于冰浴的离心管中，加入690μL双蒸水，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100μL10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中（混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要测定pH值）。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。

鼠尾胶原蛋白等实验技术应用：干细胞、血管内皮细胞等多种「难伺候」的细胞，以及一些组织在体外培养时，需要在模拟体内环境的细胞外基质中生长，胶原蛋白和纤粘蛋白正是细胞外基质的主要组成部分，富含1型胶原蛋白大鼠尾部也成了实验室用胶原蛋白的较主要来源。鼠尾取血剪下几毫米小鼠尾巴、在小鼠尾静脉上划一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到这种鲜红的。它可以用于监测小鼠血液成分的变化，确认小鼠是否患上了糖尿病或者某些治好能够改变小鼠的血糖等。比起心脏和眼部取血，实验用鼠尾尖取血的取血量较小，但取血之后，小鼠还能继续下一步建模或者实验，完全没有性命之忧。鼠尾胶原醋酸溶解：在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。

鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06X体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液(均需要无菌、预冷):10xPBS(可含10mg/L的酚红用于pH指示)或10x培养液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),双蒸水不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul生友鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul10xPBS或10x培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。鼠尾胶原蛋白的用途是什么：顾名思义，鼠尾胶原蛋白是从老鼠尾巴提取出来的物质。金华鼠尾胶原报价

胶原蛋白是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分。金华唐山鼠尾胶原

胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同，每一条亚基形成一股左手旋转的螺旋，其中每3个氨基酸残基形成一圈螺旋。3条左手螺旋再扭在一起形成一个右手大螺旋。这样的螺旋称为3股螺旋。小的甘氨酸残基位于3股螺旋内部。3股螺旋式的棒状胶原分子的大小约是3000×15埃，这些棒状分子首尾相连，并侧向排列形成胶原微丝（其直径可从50埃至数千埃）。胶原分子在两端及沿轴向每隔680埃的距离存在极性区，这些极性区能和重金属离子结合，使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。金华唐山鼠尾胶原

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