培养基制备的基本方法和注意事项:1、培养基各成份的混合和溶化培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。好好使用不锈钢锅加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸2、培养基pH的初步调正因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化,培养基各成分完全溶解后,应进行PH的初步调正。例如,牛肉浸液约可降低pH0.2,而肠浸液pH却会有明显的升高。因此,对这个步骤,操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的好终PH,保证培养基的质量。PH调整后,还应将培养基煮沸数分钟,以利培养基沉淀物的析出。3、培养基的过滤澄清液体培养基必须较全澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀,因此,须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应折叠成折扇或漏斗形,以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。培养基制备器小倒管浸满培养基(不留气泡)后再加入到盛LST的试管中。山东自动培养基制备器
微生物检验培养基制备的要点:培养基摆斜面,灭菌完成后,将试管中的中海琼脂培养基放在木棒或玻璃棒上,同时它很热,并且有适当的坡度。冷却后使琼脂凝固并变成斜面。斜面长度不超过试管的二分之一。微生物培养基质检,检验培养基灭菌后,发现有破损,浸水,颜色异常,棉塞被培养基污染。所有这些都必须丢弃,不能重复使用,并确定其很终pH值。无菌检查和效果检查也是必需的。无菌检查是取1~2瓶无菌培养基,37℃孵育一两天,确认无细菌生长;效果检查是将标准菌株接种到相关培养基上进行细菌检查。动物的生长、形态和生化条件与已知条件一致。两个条件都合格,准备好的培养基就可以使用了。青海培养基制备器供应商制备培养基的操作要点:成分基本上溶于水,没有明显的固形物,。
制备培养基有什么要求:1、培养基需保持澄清,便于观察细菌的生长情况,培养基加热煮沸后,可用脱脂棉花或绒布过滤,以除去沉淀物,必要时可用鸡蛋白澄清处理,所用琼脂条要预先洗净晾干后使用,避免因琼脂含杂质而影响透明度。2、盛装培养基不宜用铁、铜等容器,使用洗净的中性硬质玻璃容器为好。3、培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的,又要注意不因加热而降低其营养价值,121℃15min即可,如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等,则应采用低温灭菌或间歇法灭菌,一些不能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC、克菌素等,待基础琼脂高压灭菌后凉至50℃左右再加入。
消毒与灭菌的区别:消毒指使用较为温和的物理或化学方法单杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(对于一些不耐高温的液体)还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法:①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。培养基的实验室制备:正确制备培养基时微生物检验的较基础步骤之一。
什么是细胞培养:细胞培养是指从动物或植物中提取细胞,然后在人工环境中进行培养以进行科学研究。较早的细胞培养技术是在100多年前开发的,为科学的巨大突破做出了贡献。如今,它已成为全世界实验室用于研究细胞的生理学、生物化学、疾病潜在机制以及药物和有毒化合物的作用的基本工具。它也可用于在药物筛选和大规模制造生物化合物,诸如疫苗和治病性蛋白质。贮存:培养基在30℃下放置1天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。全自动培养基制备仪主要特点:外部管口连接处可直接喷灯消毒。青海培养基制备器供应商
培养基制备器利用与外部水连接的盘状热交换器,能够使内部迅速冷却。山东自动培养基制备器
培养基的实验室制备:1.pH的测定和调整:用pH计测定pH,必要时在灭菌前调节pH,除特殊说明外,培养基灭菌后冷却至25℃时,要求pH的变化不超过0.2pH单位.通常使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度约为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调节pH。如果灭菌后调节pH,溶液需灭菌。注:商品化培养基在高压灭菌前后pH可能发生明显变化,但使用蒸馏水或去离子水时,灭菌前无需调节pH。2.分装:将配置好的培养基分装到适当的容器中,容器的体积至少为体积的1.2倍。山东自动培养基制备器
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