GD基本培养基

以MS培养基母液为基础，向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL，微量元素100×母液20mL，铁盐100×母液20mL，维生素100×母液20mL，肌醇200×母液10mL，甘氨酸200×母液10mL，配制得MS培养基后，再加入0.5mg·L-1的BA8mL，0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水，加入40g蔗糖后搅拌使其溶化，用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0。加入14g琼脂，将铝锅置于电炉上，搅拌加热使琼脂完全溶化，然后用蒸馏水定容至终体积2L，继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中。液体培养基、固体培养基和半固态培养基是常用的培养基种类。GD基本培养基

培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基等。培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌。培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。配好后不宜久置，现配现用。氯化钠胰蛋白胨稀释液培养基是一种供养分离的微生物和生物样品的营养物质基质。

选择性培养基(selective media) 选择性培养基含有营养物(增菌剂)和抑菌剂(选择剂)，标本接种于此类培养基后，由于抑菌剂的选择性抑制作用，使非目的菌受到不同程度的抑制，更有利于目的菌的增殖或分离。利用选择性培养基经过一定时间的增菌培养，再接种于选择性鉴别培养基，可以提高目的菌的阳性检出率。抑菌剂的种类很多，常用的有孔雀绿、灿烂绿、亚硒酸钠、去氧胆酸钠、胆盐、四硫磺酸钠等。抑菌剂的加入量要适宜、准确，有的剧毒，有的不耐高热，配制时须特别注意。

培养基的分类有几种呢？按照培养基用途区分：1.基础培养基，一类含有一般微生物生长繁殖所需基本营养物质的培养基。牛肉膏蛋白胨培养基是常用的基础培养基。2.加富培养基，一类在基础培养基中加入血、血清、动植物组织提取液制成的培养基。用于培养要求比较苛刻的某些微生物。3.选择培养基，一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，普遍用于菌种筛选等领域。培养基的配方也会受到环境、药物和其他外部压力的影响，因此，在实际应用中需要不断进行调整和改进。

动物细胞培养必需的溶液，平衡盐水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基础溶液。PH调整液：3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羟乙基哌嗪乙烷磺酸）细胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、胶原酶溶液。1)青、链霉素，每毫升培养液含100U青霉素和100ug链霉素。2)卡那霉素：终浓度为50ug/ml培养液。3）制霉菌素：浓度25U/ml，小瓶分装，每瓶一次用完。常用的动物血清主要有牛血清和马血清。牛血清分为胎牛血清和犊牛血清，前者来源少，价格高；后者要求刚产下尚未哺乳的小牛，因为哺乳后的小牛血清中可能含有更复杂的成分。血清中已知的成分主要有蛋白质、氨基酸、葡萄糖等。蛋白质主要是白蛋白和球蛋白。常见的培养基有LB培养基，YPD培养基，M9培养基和DMEM培养基等。阿须贝氏葡萄糖培养基

培养基是用于微生物、细胞、组织等体外培养的营养精制的物质。GD基本培养基

培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的较适pH条件各不相同，一般来讲，细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是，在微生物生长繁殖和代谢过程中，由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累，会导致培养基pH发生变化，若不对培养基pH条件进行控制，往往导致微生物生长速度下降或（和）代谢产物产量下降。因此，为了维持培养基pH的相对恒定，通常在培养基中加入pH缓冲剂，常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐（如KH2PO4和K2HPO4）组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性，KH2PO4溶液呈酸性，两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时，H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物，培养基pH不会过度降低；如果培养基中OH-浓度增加，OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物，培养基pH也不会过度升高。GD基本培养基

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