徐州北京鼠尾胶原

要准备的器具：组织剪2把，有齿镊1把，无齿镊1把，200ml烧杯1个，培养皿1个，带盖广口瓶1个，离心管、小瓶数个，滴管若干。以上物品须经严格高压消毒灭菌。需配制的液体0.1％醋酸溶液。经44.48N10min高压蒸汽灭菌(或是过滤除菌)后备用。此外还有用消毒双蒸水配制75％酒精溶液。取大鼠尾巴，洗净，置75%酒精浸泡消毒后，手持尾巴，用止血钳夹住尾巴较高，折断尾骨后拉出尾腱，将尾腱剪碎后置消毒的三角烧瓶中，称尾腱的重量，按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液，摇晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置48小时，离心。吸取其上清，分装至小瓶，4℃保存。上述制备过程均在无菌条件下完成。酸法提取主要采用低离子浓度酸性条件浸渍处理原料，从而破坏分子间的盐键和希夫碱。徐州北京鼠尾胶原

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：胶原蛋白具有抗氧化作用，但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建，对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的：探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法：将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿（实验组）和普通培养皿（对照组）中，并且均用0，10，100μmol/LH2O2诱导。24h后，以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态，应用MTT比色法检测心肌细胞存活率，TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态，流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率，黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平，Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。太原鼠尾胶原报价制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。

胶原蛋白的应用：1.胶原天然的紧密的纤维结构，使胶原材料显示出很强的韧性和强度，适用于薄膜材料的制备；2.大较胶原被用作制造肠衣等可食用包装材料．其独特之处是：在热处理过程中．随着水分和油脂的蒸发和熔化．胶原几乎与肉食的收缩率一致。而其他的可食用包装材料还没被发现具有这品质；3.由于胶原分子链上含有大量的亲水基团．所以与水结合的能力很强．这一性质使胶原在食品中可以用作填充剂和凝胶；4.胶原在酸性和碱性介质中膨胀，这一性质也应用于制备胶原基材料的处理工艺中。

鼠尾胶原为贴附底物的人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式,为人鼻腔黏液纤毛运输系统的研究提供科学有效的方法。方法制备鼠尾胶原并铺片,以鼠尾胶原为贴附底物组织块培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞,培养7天时进行HE染色及扫描电镜和透射电镜观察细胞形态和结构,应用高速摄像技术测量纤毛摆动频率。结果鼠尾胶原要平坦均匀,平均厚度约为1mm;HE染色可见上皮细胞呈单层向周围爬开;扫描电镜下见纤毛上皮细胞呈不规则多角形,纤毛周围可见微绒毛;透射电镜下可见纤毛上皮细胞间为紧密连接;同一细胞任意两点纤毛摆动频率是相同的;同一来源体外培养的钩突和下鼻甲的纤毛摆动频率是相同的。结论以鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立,为今后研究鼻内用药对纤毛除去功能的影响提供了良好的方法和途径。鼠尾胶原，是一种天然培养基，它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用。

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明：不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。鼠尾胶原醋酸溶解：建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底铺上一层氯仿。南京贵阳鼠尾胶原

I型胶原蛋白分布非常普遍，是主纤维束的主要成分。徐州北京鼠尾胶原

鼠尾胶原简介：鼠尾I型胶原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备，纯度达到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准：1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞，贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL，pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶，NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。徐州北京鼠尾胶原

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