湖南琼脂培养基制备仪

马铃薯培养基的分装：1.根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。2.琼脂斜面分装量为试管容量的1/5，灭菌后须趁热放置成斜面，斜面长约为试管长的2/3。3.半固体培养基分装量约为试管长的1/3，灭菌后直立凝固待用。4.高层琼脂分装量约为试管的1/3，灭菌后趁热直立，待冷后凝固待用。5.液体培养基分装于试管中，约是试管长度的1/3。6.琼脂平板：将灭菌(或加热融化)后的培养基冷至50℃左右，以无菌手续倾人灭菌平皿内，内径225px的平皿倾注培养基约13～15ml，轻摇平皿底，使培养基平铺于平皿底部，待凝固后即成，倾注培养基时，切勿将皿盖全部启开，以免空气中尘埃及细菌落入新制成的平板培养基(简称平板)，表面水分较多，不利于细菌的分离，通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。培养基根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、培养基等。湖南琼脂培养基制备仪

制作牛肉膏蛋白胨固体培养基：（1）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。（2）倒平板操作的步骤：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。④等待平板冷却凝固，大约需5～10min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。倒平板操作的讨论1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。湖南琼脂培养基制备仪液体培养基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。

培养基制备仪：培养基的种类繁多，但制备的方法大同小异，一般可分为6个步骤：用水、称量、溶解复水、灭菌、pH测定、保存。1、必须选用专门纯净水或者经消毒过后的无菌水。2、培养基进行复水的容器不得用铜锅或铁锅，放置离子混入培养基中，影响微生物的生长。3、容器的体积须大于复水后培养基总体积的2倍，预防出现溢出情况。4、在对培养基进行加热时，若培养基内含有琼脂粉成分，则需要将其充分浸泡一段时间。加热的过程中不断进行搅拌防止出现培养基结底炭化从而造成成分损害。部分培养基则需要使用沸水进行加热，预防发生局部烧焦及沸腾溢出。5、琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热，较多只能加热两次，第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去。6、而当对培养基实施灭菌时，需严格按照说明规范操作。但是也不能盲目按照说明的时间进行，需结合实际情况，合理调节灭菌时间，防止出现培养基灭菌过度而造成的成分变性。

培养基制备仪-培养基使用规程：1.目的：规范本中心微生物实验室培养基的使用和管理。2.适用范围，本规程适用于培养基的储存、融化和废弃等。3.职责，3.1检验人员：按照本规程规范使用培养基、定期检查培养基是否失效。3.2科室负责人：负责指导、监督检验人员规范使用培养基。4.使用程序，4.1培养基的储存，4.1.1除特殊说明和标准规定，通常情况下基础培养基（如营养琼脂培养基）应在4℃冰箱中保存不超过3个月，或在室温（20℃）下保存不超过一个月。选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。

培养基灭菌方法有哪五种类型：1、辐射灭菌原理方法：辐射灭菌原理：是用高能电磁辐射和细菌核酸的光化学反应引起细菌死亡。常用的是紫外线，X射线和伽马射线。主要用于室内空气和器皿的表面消毒。2、干热灭菌原理方法：干热灭菌原理：是采用高温氧化微生物，使蛋白质变性并浓缩电解质以杀死微生物。3、化药灭菌原理方法，化药灭菌原理：使用化药与微生物细胞中的成分发生反应，从而使蛋白质变性酶失活。4、过滤灭菌原理方法：过滤灭菌原理：是使用不能渗透的微生物滤膜进行灭菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的细孔滤膜对压缩空气，酶溶液和其他对热不稳定的复合溶液进行灭菌。5、湿热灭菌原理方法：在工业生产中，用于灭菌对于培养基，管道和设备，通常将蒸汽加热到一定温度并保持一段时间，这称为湿热灭菌。湿热灭菌原理：是直接用蒸汽进行灭菌。蒸汽冷凝后会释放出大量潜热。蒸汽具有强大的穿透力，破坏细菌蛋白质和核酸的化学键，使酶失活并杀死由于代谢紊乱引起的微生物。固体培养基，一类配制成的固体状态的基质。湖南琼脂培养基制备仪

半固体培养基，指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。湖南琼脂培养基制备仪

培养基的称量和溶解：小心称量所需量的脱水合成培养基（必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末），先加入适量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量后适当加热，并重复或连续搅拌使其快速分散，必要时应完全溶解。含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。注意：培养基的加热溶解或高温灭菌盛放使用的容器不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。较好使用不锈钢锅加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时搅动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。湖南琼脂培养基制备仪

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