正常情况下,菌种是需要培养2代后才会具备稳定的活性,所以建议做2次继代培养后才能用于您后续的实验。打开冻干管应在专业的微生物专业人员才可操作,注意生物危害程度为三级的菌种应在生物安全柜中操作。其中标准菌种可以在超净台中操作,并且做好个人防护。开管时要注意做好个人面部防护,防止碎片飞入眼中。以上开管操作都应该在安全柜或超净台中操作,并且操作完后所有器皿都要经灭菌后再销毁。所有的菌种操作和转移应依「实验动物微生物学等级及监测」规定订定安全等级,履行生物安全防护责任及採取必要之措施;并遵守「病原微生物实验室生物安全管理条例。菌株的培养条件和培养介质对其生长和代谢能力具有重要影响。大洋芽胞杆菌属菌株
埃希菌大小在宽0.4--0.7μm,长约1--3μm。革兰阴性。多数菌株有周身鞭毛,能运动。有菌毛,包括普通菌毛和性菌毛。有些菌株可以有致病性菌毛。肠外传染菌株常含有多糖包膜,即微荚膜。埃希菌兼性厌氧,对营养要求不高。普通琼脂平板培养37℃的环境24小时后,形成直径2-3mm的圆形凸起灰白色S型菌落。在人和动物肠道中繁殖却速度比较慢一些,成倍增长的时间为一天。在肥沃的土壤表层可存活数月。有些菌株在血琼脂平板上呈β溶血。在液体培养基中呈均匀浑浊生长。适合的温度范围是15--45℃。有些菌株对热 的抗性比较强,在60℃仍可存活15分钟。栖藻湖食物链菌菌株的多样性和变异性也是生物进化和适应性的研究对象。
导致腹泻的大肠埃希菌根据血清型的不同,分为肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠集聚型大肠杆菌(EAEC)、产志贺毒的大肠杆菌(STEC,可引起出血性结肠炎和溶血尿毒综合征)等。大肠杆菌主要是侵袭力、内有害物质、肠有害物质等致病因素引起各种炎症,如胆囊炎、泌尿系传染、肺炎、新生儿脑膜炎、伤口传染、菌血症及腹泻等。大肠杆菌肠有害物质是引起腹泻的主要致病因子。内有害物质还可引起发热、休克、DIC等。
通常铜绿假单胞杆菌温度太高,有时会得不到扩增产物;铜绿假单胞杆菌温度太低时,容易发生非特异性反应。另外,时间太短时,会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成。传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6摄氏度冰箱内保存。液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。菌株在生产过程中也需要进行品质控制和质量安全监管。
实验室所配备的离心机应在生物安全柜或本标准4.2.2中所指的其他安全设备中使用,否则必须使用安全密封的专门用的离心杯。必须给实验室工作人员配备必要的人员防护用品。实验室设计与建造的特殊要求。包括:实验室的选址、平面布置、实验室结构、通风空调、安全装置及特殊设备等设计与建造的特殊要求。 安全操作流程:本标准针对不同等级的生物安全防护实验室所规定的安全操作流程,包括标準的安全操作流程和特殊的安全操作流程,必须在实验室的生物安全手册中明列并加以执行。针对不同的微生物及其病毒应补充规定相应的特殊安全操作流程,也应在各实验室的生物安全手册中明列并加以执行。病原微生物及其病毒在实验室之间的传递,病原微生物及其病毒在实验室之间的传递必须严格按照国家现行有关管理办法执行。铜绿假单胞菌在4摄氏度不生长而在42摄氏度可以生长。厦门食热菌菌株
金黄色葡萄球对高温有一定的耐受能力,在80℃以上的高温环境下30min才可以将其彻底杀死。大洋芽胞杆菌属菌株
铜绿假单胞杆菌使用应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤,因Ca2、Mg2和血清、蛋白质克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2、Mg2的BSS,如:D-Hanks液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。细胞消化时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响;消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。细菌生物膜在铜绿假单胞菌影响中普遍存在,是导致抗抵菌疗养失败的重要原因之一。大洋芽胞杆菌属菌株
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