临床慢病毒转导实验技巧

产品介绍LentiBOOST是德国SirionBiotech开发的一种高效、无细胞毒性的慢病毒转导增强剂，用于临床前和临床的慢病毒载体转导。它是一种非离子型、非受体依赖性的表面活性剂，通过降低细胞膜粘稠度、提高脂质交换和跨膜转运，促进慢病毒与细胞膜的融合，提高转导效率。目前该产品在美国和欧洲已有30多个药物phaseIII/II/I临床实验中，并有相关药物已上市销售。产品特点l增强慢病毒转导效率，可高达90%—提高zhi liao蛋白表达量，有利于取得临床试验成功l减少MOI低至2倍，从而降低COGS（Costofgoodssold）——减少Lentivirus的用量和物料成本l控制单个细胞中的病毒载体拷贝数（VCN，VirusCopyNumber）——符合FDA/EMA对ATMPs(AdvancedTherapyMedicinalProducts)产品的安全标准l易于使用——无需改变现有转导流程，兼容已经开发流程l提供研究级和GMP级——GMP级具有临床试验的所有必备文件l30多种应用LentiBOOST慢病毒转导增强剂的药物已在美国和欧洲进入临床试验（PhaseIII和PhaseI/II）阶段——加速了IND文件归档国内做慢病毒转导增强剂的公司。临床慢病毒转导实验技巧

慢病毒载体是一种源于人类免疫缺陷病毒的基因载体，被guangfan用于真核细胞如造血干细胞和神经细胞的基因编辑。随着对基因递送工具长期深入的研究，慢病毒作为基因载体已然guangfan用于基础研究和临床实践当中。如在白血病的临床zhiliao中，慢病毒可以ganranT细胞，使其可以识别并且杀灭ZhongLiuB细胞；在地中海贫血的zhiliao中，慢病毒可以将正常的β-珠蛋白基因序列送入造血干细胞中，矫正贫血症状；它还在很多单基因遗传病的zhiliao中发挥很大作用。随着后基因组时代的来临，基因zhiliao在医学研究中所占比重越来越大。一些难以gengzhi或者缓解的传统疾病可以通过基因zhiliao缓解甚至zhiyu，慢病毒为未来基因zhiliao的发展提供了新的工具和方法。更多关于慢病毒转导的相关产品问题，欢迎咨询上海曼博生物！快速慢病毒转导系统有可以增加慢病毒导的试剂么？

近几年LentiBOOST作为一种无毒性的化学转导增强剂guang fan引起关注。LentiBOOST通过与细胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂质交换和跨膜转运，提高转导效率。研究证实LentiBOOST在不影响转导细胞存活、增殖及分化能力的前提下，提高小鼠T细胞、HSCs和人HSCs的慢病毒转导效率。LentiBOOST是德国Sirion Biotech开发的一种高效、无细胞毒性的慢病毒转导增强剂，用于临床前和临床的慢病毒载体转导。它是一种非离子型、非受体依赖性的表面活性剂，通过降低细胞膜粘稠度、提高脂质交换和跨膜转运，促进慢病毒与细胞膜的融合，提高转导效率。

LentiBOOST是德国SirionBiotech开发的一种高效、无细胞毒性的慢病毒转导增强剂，用于临床前和临床的慢病毒载体转导。它是一种非离子型、非受体依赖性的表面活性剂，通过降低细胞膜粘稠度、提高脂质交换和跨膜转运，促进慢病毒与细胞膜的融合，提高转导效率。目前该产品在美国和欧洲已有30多个药物phaseIII/II/I临床实验中，并有相关药物已上市销售。LentiBOOST可广泛应用于多种临床相关细胞类型，包括CD34+造血干细胞（HSCs），间充质干细胞（MSCs），神经干细胞，原代T细胞，NK细胞和成纤维细胞等，对于难转导的小鼠T细胞亦有效。已成为改进体外基因zhi liao和CAR-T细胞zhi liao的临床转导方案的理想选择。什么可以帮助增强慢病毒转染？

慢病毒gan ran效率受到多种因素的影响，首先，考虑病毒包装制备是否存在问题，比如外源基因是否正确，病毒滴度是否合格等。其次，考虑病毒运输和保存方式是否得当，解冻病毒一定要在冰上进行，避免反复冻融，否则会影响病毒滴度；-80℃保存半年以上需要重新测定滴度。细胞状态对于慢病毒转导效率也具有很大的影响，良好的生长状态是达到高gan ran效率的保证，一般选择细胞形态较好、轮廓清晰、处于对数生长期的细胞进行gan ran可提高gan ran效率。

第三代慢病毒载体系统又增加了两个安全特性：一是构建了自身失活的慢病毒载体，即删除了U3区的3’ LTR，使载体失去HIV-1增强子及启动子序列，即使存在所有的病毒蛋白也不能转录出RNA；二是去除了tat基因，代之以异源启动子序列，这样原始的HIV基因组中的9个基因在慢病毒载体中只保留了3个（gag、pol和rev） ，因此第三代慢病毒载体系统更加安全。与第三代系统相比，第二代慢病毒系统使用更多的HIV蛋白（在较少的质粒上）以产生功能性慢病毒颗粒。第三代包装系统不表示tat，被认为比第二代系统更安全，但可能更难使用，因为它们需要用四个单独的质粒转染才能产生功能性慢病毒颗粒。慢病毒包装系统一般都是三质粒或四质粒包装系统。

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Sirion Biotech GmbH 公司于2007年在德国马丁雷德成立，此后一直致力于改变病毒载体供应的模式。Sirion载体被用于基因功能研究、临床前靶点验证、基因zhi liao和疫苗开发。Sirion Technologies获得了欧洲和美国几项主要临床试验（Phase I/II/III）的许可，是欧洲主要的病毒载体技术商业供应商，在短时间内可提供quan mian的定制病毒载体组合，并提供个性化项目管理服务。慢病毒载体的研究发展得很快，研究的也非常深入，在美国已经开展了临床研究，效果非常理想，因此具有广阔的应用前景。慢病毒也被guang fan地应用于表达RNAi的研究中。由于有些类型细胞转染试剂瞬时转染效果差，转移到细胞内的siRNA半衰期短，体外合成siRNA对基因表达的抑制作用通常是短暂的，因而使其应用受到较大的限制。SIRION Biotech 为研究机构和医院开发了一种定制的许可模式，并为临床试验提供良好的 GMP 材料供应条件。LentiBOOST 目前在美国和欧洲的多个临床试验中使用。LentiBOOST（Pharma grade）jin用于药物级的临床前研究和工艺开发，以及评估研究。LentiBOOST（GMP grade）用于临床阶段方案，目前美国和欧洲多个 Phase III 和 Phase I/II 临床试验正在进行。临床慢病毒转导实验技巧

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