培养基的灭菌：一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中，如无特殊规定，即可用此法灭菌。某些热敏成分，如糖类，应另行配成20%或更高的浓液，以过滤或间歇灭菌法消毒，以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50°C左右的培养基中。琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出，冷至55℃-60℃时，摆置成适当斜面，待其自然凝固。有的培养基还含有素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。新疆琼脂灭菌 培养基制备仪
培养基的使用：1.琼脂培养基的融化：将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min），以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温，冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用，放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特别是灵敏性培养基，应根据相关标准，缩短融化后放置的时间。新疆琼脂灭菌 培养基制备仪异养微生物的合成能力较弱，不能以CO2作为碳源或主要碳源，故应在培养基中至少添加一种有机物。
培养基制备器：主要应用于液体培养基及微生物培养基的培养基制备器。高效的加热和冷却，良好的加热元件能确保快速加热。培养基容器外壁的水循环能保证快速冷却。通过热交换器不断地将热的去离子水冷却。总循环时间为60至120分钟，包括加热、灭菌和冷却，具体时间取决于容器的大小，培养基的量和冷却水的温度。无菌过滤的支持压力可以防止培养基发泡或溢沸。触摸屏技术，新使灭菌器操作起来有了更多的选择，增加了灵活性。加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
培养基防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用细菌、病菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自自立的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。基础培养基各种微生物的营养要求虽不相同，但多数微生物需要的基本营养物质相同。
马铃薯培养基的制作过程：(1)称量和熬煮：按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。(2)加热溶解：把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量。(3)分装：按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。(4)加棉塞：培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能。要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质，配制针对性强的培养基。吉林琼脂培养基 培养基制备仪
固体培养基根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。新疆琼脂灭菌 培养基制备仪
固体培养基的制作步骤：1、首先我们要准备好一个装有1000ml的烧杯，然后在准备好的杯中在放入500ml的蒸馏水，在将牛肉膏和蛋白胨、氯化钠这些都溶解在水中。2、其次我们在调节PH值，调节时需要百分之10的氢氧化钠溶液，将PH值调到7.2，在此也要定容到1000ml，较后在将这些液体都分别放入10个锥形瓶内，每一瓶都装100ml。3、然后我们再把剪碎的琼脂放进五个锥形瓶里，在给每个锥形瓶中放入2.4克，然后在把这十个锥形瓶瓶口都弄上棉花塞，瓶子也要弄上报纸。4、较后我们就可以将刚才所包扎好的一些锥形瓶放入灭菌锅里，灭菌时一定要记得灭菌十分钟，十分钟到了之后，在将锥形瓶拿出来，冷却之后就成了固体培养基了。注意事项：倒入时一定要注意容易。灭菌时间十分钟，要看好时间。注意事项：倒入时一定要注意容易。灭菌时间十分钟，要看好时间。新疆琼脂灭菌 培养基制备仪
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