培养基配制--容器和水:配制培养基所用的容器不得影响培养基质量,一般为玻璃容器,培养基配制所用的容器和配套器具应洁净,可用纯化水冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质残留。在大体积配制培养基时,企业也可根据自己的情况采用不锈钢容器,建议专锅,且容器应洁净。不建议使用陶瓷或搪瓷容器。培养基用水是培养基制备过程中非常重要的一个物质。不可以使用自来水,自来水中的杂质可能会对检验结果有一定的影响。许多法规在培养基配方中采用蒸馏水作为配制用水,实际上纯化水的洁净程度不差于蒸馏水,甚至更优,所以不必单独制备蒸馏水,直接使用纯化水即可,配制用纯化水应按药典的要求定期进行检测。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性。安徽培养基灭菌 培养基制备器
培养基的类型:天然培养基天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。用作这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源普遍,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基。这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响。湖北琼脂培养基 培养基制备器培养基的过滤澄清液体培养基必须澄清,琼脂培养基也应透明无明显沉淀。
溶化:培养基放入烧杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,边加入边用玻璃棒搅拌。如果培养基中不含有琼脂,培养基不需要加热;如果含有琼脂,则需要用本生灯或电磁炉加热煮沸,完全溶解后,再补齐所需水,并搅拌均匀。如果配置的培养基量很大,可用不锈钢锅加热溶化,可先用温水加热并随时搅动,防止焦化,如有焦化现象,配制的培养基就不能使用,要重新配制。配制培养基时不可用铜或铁的容器溶化,因铜或铁制容器可能会使培养基中的铜和铁的含量超标,影响实验(培养基中铜含量大于0.3mg/L,细菌不宜生长,铁含量超过0.14mg/L,妨碍细菌产有害)。对容易发生反应,产生沉淀的药品,要分开溶解,较后加入培养基,如磷酸二氢钾和硫酸镁。
培养基的实验室制备:1.过滤灭菌:过滤灭菌可以在真空负压或正压条件下进行。使用无菌设备和0.2um孔径的滤膜。将过滤装置的各个部分消毒灭菌,或使用预消毒设备。一些滤膜上附着蛋白质或其他物质()。为达到有效过滤,应事先将滤膜用无菌水润湿。2.监测:应对经湿热或过滤灭菌的培养基进行监测,尤其要对pH、色泽、灭菌效果和均匀度等指标进行监测。添加剂的制备:制备含有有毒物质(生素)时应小心操作,避免因粉末的扩散造成实验人员过敏或发生其他不良反应。采用适当的预防措施并小心按照产品使用说明操作。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。
Systec培养基准备器可以快速的准备好灭菌,放入灭菌锅,“水套系统”里加入夹层水(灭菌锅与灭菌锅腔体之间的夹套水用于有效的热传导),加入培养基原料,准备启动灭菌程序。培养基可以直接在Sampleprep内悬浮溶解。强力磁力搅拌确保培养基在内腔里混合的均匀性,并防止凝结。培养基可以在灭菌前用WATERBATH(水浴)模式预先溶解。同时,直观的图形化界面使没有经过专门培训的人员也能方便的操作。用户可以自定义设置多达50个灭菌程序,比如灭菌温度、时间、分装温度等。它们可以被储存起来并随时调用。强力磁力搅拌培养基在内腔里混合的均匀性得到确保,并避免凝结。湖北琼脂培养基 培养基制备器
培养平板培养基也叫平面培养基、平皿培养基。安徽培养基灭菌 培养基制备器
培养基的性能测试:1.外观控制:制备好的培养基应有相应的颜色,一般的培养基应澄清、无浑浊、无沉淀。使用前应检查培养基的颜色是否发生变化,是否蒸发/脱水。2.污染控制:从每批制备好的培养基中选取部分进行污染测试(无菌试验),确定无微生物生长方可使用。3.性能测试:(1)测试菌株选择:测试菌株是具有其表示种的稳定特性并能有效证明实验室特定培养基较佳性能的一套菌株。(3)半定量测试方法(改进的划线法接种法)。(4)定性测试方法(平板接种观察法)。用接种环取测试菌培养物,在测试培养基表面划平行直线。安徽培养基灭菌 培养基制备器
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