大肠杆菌的耐药机制:根据细菌耐药性的起源,可将其分为两类:一类为固有耐药性(intrinsicresistance),即耐药性的产生并不依赖于抑菌药物的存在,而是细菌细胞所固有的,与细菌的遗传和进化密切相关。固有耐药性是细菌稳定的遗传特性,它受细菌染色体DNA控制并且是同属细菌的共同特征,固有耐药性包括自发基因突变导致的耐药性和细胞膜药物外输作用引起的耐药性。另一类为获得性耐药性(acquiredresistance),是指细菌在抑菌药物选择性压力存在下经过基因突变。或细菌在生长过程中由于移动耐药因子的转移而获得的一种表型。其中,移动因子包括质粒、转座子、整合子和噬菌体。获得性耐药性主要包括移动因子和抑菌药压力作用下引起基因突变所导致的耐药性。用分子生物学方法在大肠杆菌得出的结论可用于其它生物的研究。杀蝗金龟子绿僵菌
大肠杆菌属的系统发育:大量属于该物种的菌株已得到分离和鉴定。除了血清型(videsupra),它们还可以根据它们的系统发育(即推断的进化史)进行分类。如下所示,其中该物种分为六组。特别是全基因组序列的使用产生了高度支持的系统发育。基于这些数据,大肠杆菌的5个亚种被区分开来。系统发育距离(“关联性”)和病理学之间的联系很小,例如O157:H7血清型菌株形成一个分支(“一个独特的群”)—下面的E群——都是肠出血性菌株(EHEC),但并不是所有的EHEC菌株都是密切相关的。事实上,四种不同的志贺氏菌嵌套在大肠杆菌菌株(见上),然而E.albertii和E.fergusonii不属于这个群体。事实上,在包括类型菌株在内的系统基因组研究中,所有志贺菌都被放在大肠杆菌的一个亚种内,因此很难进行相应的重新分类。所有常用的研究菌株大肠杆菌属于a组,主要来源于Clifton的K-12菌株(λ⁺f⁺。O16)并且在较小程度上来自d'Herelle的大肠杆菌菌株(B菌株)(O7)。墨西哥毕赤酵母菌种枯草芽孢杆菌在液体培养基中生长时,常形成皱醭。
枯草芽孢杆菌是一类普遍分布于各种不同生活环境中的革兰氏阳性杆状好养型细菌,可以产生内生芽孢,耐热抗逆性强,在土壤和植物的表面普遍存在,同时还是植物体内常见的一种内生菌,对人畜无毒无害,不污染环境。由于枯草芽孢杆菌生长速度快、营养需求简单,易于存活、定殖与繁殖,无致病性,并可以分泌多种酶和抗生养素,常用作生物类型杀菌剂。枯草芽孢杆菌大小为(0.7~0.8)×(2~3)μm[内生芽孢大小为(0.6~0.9)×(1.0~1.5)μm],具有单层细胞外膜,有鞭毛,能运动,无荚膜,普遍存在于腐烂的有机物和土壤中,容易在枯草浸汁中繁殖,所以命名为枯草芽孢杆菌。
由于不同培养基的选择性存在差异,检测铜绿假单胞菌时,如有必要,采用不同培养基进行分离培养,可有效防止漏检现象的发生,提高检出率。绿脓菌素试验需加入氯仿将铜绿假单胞菌产生的色素溶出,此时可采用无菌操作将培养基捣碎,并适当延长浸泡时间,这样可使阳性结果更明显。因实验室温度存在差异,室温较低时明胶培养基呈凝胶状,室温较高时呈液体状,这是正常现象,不会影响明胶液化试验的结果。进行明胶液化试验时,在(35土2)摄氏度条件下明胶培养基呈液态,要判定试验结果必须将其置于(4~10)摄氏度冰箱中10分钟~30分钟,如明胶培养基仍为液态则明胶液化试验为阳性;如明胶培养基凝固,则明胶液化试验为阴性。铜绿假单胞菌普遍存在,而在潮湿环境尤甚。
大肠杆菌的培养:将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养,逐级扩大培养得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境。菌种经过冷冻干燥后,生长延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长。将菌种接种至一新鲜培养基上,每萌发一次即为一代,因此,当原始菌种复溶并转至新培养基内生长,即认为已传代一次,从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第0代,冷冻干燥的原始菌种开启后转种为第1代,直到第3代为工作菌种。菌种的传代次数(自原始菌种冻干粉起)不得超过5代。直接从冻存摇的菌甘油放了不少可能会抑制菌的生长,活力差,而且多余的甘油对细菌生长不利,经划板的菌株活力好,可以挑菌摇菌提质粒或者做表达用。金黄色葡萄球是常见的化脓性球菌,是医院交叉传染的重要来源。表皮葡萄球菌
铜绿假单胞菌为专性需氧菌。杀蝗金龟子绿僵菌
SHBCCD23928绳状篮状菌SHBCCD23929绳状篮状菌SHBCCD23930绳状篮状菌SHBCCD23931产黄青霉SHBCCD23932金灰青霉SHBCCD23933谢瓦散囊菌SHBCCD23934产黄青霉SHBCCD23935黑曲霉SHBCCD23936谢瓦散囊菌SHBCCD23937烟曲霉SHBCCD23938金灰青霉SHBCCD23939溜曲霉SHBCCD23940聚多曲霉SHBCCD23941米根霉SHBCCD23942黄曲霉SHBCCD23943黑曲霉SHBCCD23944米根霉SHBCCD23945小孢根霉SHBCCD23946琉球曲霉SHBCCD23947微小根毛霉SHBCCD23948微小根毛霉SHBCCD23949横梗霉属SHBCCD23950紫色红曲SHBCCD23951紫色红曲SHBCCD23952红色红曲菌SHBCCD23953紫色红曲菌SHBCCD23954紫色红曲菌SHBCCD23955紫色红曲菌SHBCCD23956谢瓦散囊菌SHBCCD23957谢瓦散囊菌SHBCCD23958谢瓦散囊菌SHBCCD23960间座壳属SHBCCD23961琉球曲霉SHBCCD23962琉球曲霉SHBCCD23963琉球曲霉SHBCCD23964青霉属SHBCCD23965伞枝横梗霉SHBCCD23966新黑曲霉SHBCCD23967新黑曲霉SHBCCD23968新黑曲霉杀蝗金龟子绿僵菌
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