金黄色葡萄球菌的检验方法操作步骤:增菌培养法:(1)检样处理:按无菌操作取检样25g(ml),加入225mL灭菌生理盐水,固体样品研磨或置均质器中制成混悬液。(2)增菌及分离培养:吸取5ml上述混悬液,接种于7.5%氯化钠肉汤或胰酪陈大豆肉汤50mL培养基内,36℃士1℃培养24h,转种血平板和Baird一Parker平板,36℃士1℃培养24h,挑取血平板上金黄色(有时为白色)菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。(3)形态:本菌为革兰氏阳性球菌,排列呈葡萄球状,无芽胞,无荚膜,致病性葡萄球菌菌体较小,直径约为0.5um~1um。铜绿假单胞菌按照血清学分型利用O抗原进行分型,可分20个血清型。肠沙门氏菌肠亚种乌干达血清型
SHBCCD24777黑曲霉AS3.3928定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)AspergillusnigerSHBCCD24778土曲霉AS3.3935定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)AspergillusterreusSHBCCD24779宛氏拟青霉AS3.4253定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)PaecilomycesvariotiiSHBCCD24780绳状青霉AS3.3875定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)PenicilliumfuniculosumSHBCCD24781赭绿青霉AS3.4302定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)PenicilliumochrochloronSHBCCD24782短柄帚霉AS3.3985定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)ScopulariopsisbreuicaulisSHBCCD24783绿色木霉AS3.2942定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)TrichodermavirideSHBCCD24784黄曲霉AS3.3950定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)AspergillusflavusSHBCCD24785杂色曲霉AS3.3885定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)AspergillusversicolorSHBCCD24786绳状青霉AS3.3875定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)PenicilliumfuniculosumSHBCCD24787球毛壳霉AS3.4254定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)ChaetomiumglobosumSHBCCD24788黑曲霉AS3.3928定量孢子悬液,(1.0±0.2)×106CFU/ml)黄色薰衣草链霉菌菌株铜绿假单胞菌是假单胞菌目中的一种。
金黄色葡萄球菌免疫学检测方法:分子生物学检测方法:核酸探针技术:通过使用基因特异性核苷酸序列作为探针与目的DNA杂交的一种核酸杂交技术,通过检测该段特异性的标记物,从而判断是否含有目标微生物。核酸探针具有分子生物学检测技术的灵敏度高、特异性强的优点,但是实验周期长,操作繁琐,如果样品中目标微生物含量过低,极易造成样品目标微生物未检出,出现假阴性的实验结果。环介导等温扩增技术:该技术基于DNA扩增技术,能够在恒温条件下,根据设计的多对引物,利用链置换型DNA聚合酶快速的进行核酸的扩增。与PCR方法比较,环介导等温扩增法操作更加快捷简单,花费成本较低,且对仪器要求低,能够普遍利用在食源性致病微生物的检测中。
大多数铜绿假单胞菌资源研究利用基本上是以得到纯的培养物为前提,而真类菌在培养的过程中,必然离开原来的生长环境,营养、环境条件发生改变,这是真类菌发生性状改变的重要因子,真类菌培养物长期保藏就会不可避免的发生性状变化。难以培养的真类菌以及一些专性寄生真类菌不能在人工培养基上培养生长,其主要原因是在目前认知条件下,不能够提供此类微生物生长所需的必要条件。此外,丝状真类菌保藏一般采用保藏真类菌的孢子、菌丝,其中保藏真类菌的孢子一般周期较长,活性较为稳定,但无论在无性阶段产生分生孢子还是有性阶段产生的性孢子,都是经过基因重组阶段,这就增加了保藏菌株发生变异的可能性。金黄色葡萄球营养要求不高,在普通培养基上生长良好。
金黄色葡萄球菌的检验方法操作步骤:直接计数方法6.2.1吸取上述1:10混悬液,进行10倍递次稀释,根据样品污染情况,选择不同浓度的稀释液1mL,分别加人三块Baird一Parker平板,每个平板接种量分别为0.3mL、0.3mL、0.4mL,然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水分多不易吸收,可将平板放在36℃士1℃lh,等水分蒸发后反转平皿置36℃士1℃培养。在三个平板上点数周围有混浊带的黑色菌落,并从中任选五个菌落,分别接种血平板,36℃士1℃24h培养后进行染色镜检、血浆凝固酶试验,步骤同增菌培养法。金黄色葡萄球在自然界中无处不在,空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。褐色链霉菌菌种
金黄色葡萄球菌无鞭毛,不能运动。无芽胞,除少数菌株外一般不形成荚膜。肠沙门氏菌肠亚种乌干达血清型
铜绿假单胞菌亦称绿脓杆菌,为专性需氧菌。用传统半固体培养基保存绿脓杆菌的方法,一般3个月左右就需再次移种;若保存到半年则有存活率低、复苏后色素不明显、长期保存易发生变异等缺点。应用较低温甘油保存法后,现已保存两年多,菌种存活率高达100%,且细菌的微生物特性未发生变异,该方法明显优于传统的半固体保存方法,较低温甘油保存法需要配制无菌肉汤,称取牛肉膏5.0g、蛋白胨10.0g,氯化钠0.5g,加入1000毫升蒸馏水中,加热溶解,调pH至7.4~0.2。按每管1.7毫升分装于华氏管中,121.3摄氏度、20分钟高压灭菌。肠沙门氏菌肠亚种乌干达血清型
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