金黄色葡萄球菌的检验方法操作步骤:血浆凝固酶试验:吸取1:4新鲜兔血浆0.5mL,放入小试管中,再加人培养24h的金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤堵养物0.5mL,振荡摇匀,置36℃士1℃温箱或水浴内,每半小时观察一次,观察6h,如呈现凝固,即将试管倾斜或倒置时,呈现凝块者,被认为阳性结果。同时以已知阳性和阴性葡萄球菌株及肉汤作为对照。直接计数方法6.2.1吸取上述1:10混悬液,进行10倍递次稀释,根据样品污染情况,选择不同浓度的稀释液1mL,分别加人三块Baird一Parker平板,每个平板接种量分别为0.3mL、0.3mL、0.4mL,然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水分多不易吸收,可将平板放在36℃士1℃lh,等水分蒸发后反转平皿置36℃士1℃培养。铜绿假单胞菌生长温度范围25~42摄氏度。马德普拉塔无色杆菌菌种
金葡菌普遍存在于自然环境中,如空气、土壤,是一种常见的需氧微生物。一方面,金黄色葡萄球菌可能导致人体体内传染致病菌,导致人患上一些传染性疾病,比如中耳炎、人体部位化脓等,还有可能造成皮肤上长出疖子;另一方面,金黄色葡萄球菌还可能引起人体内产生有害元素,有害元素多到一定的量,可能引发食物中毒。人和动物是主要的病菌携带者,大约50%以上健康个体的鼻腔、咽喉、头发和表皮中都带有这种菌。国际公认产生葡萄球菌肠有害元素的菌量浓度在100000个/克以上。金葡菌肠有害元素中毒可使人产生剧烈的恶心、呕吐,同时伴有上腹部绞痛、腹泻。严重者可导致虚脱、肠痉挛和严重失水。海假交替单胞菌菌种铜绿假单胞菌中的原内毒养素蛋白质是一种高分子、低毒性,原性强的保护性抗原。
铜绿假单胞菌为需氧或兼性厌氧菌,在普通培养基上易于生长,培养适宜温度为35度,PH值为7.2。普通琼脂形成光滑,微隆起,边缘整齐波状的中等大菌落。由于产生水溶性的绿脓素(呈蓝绿色)和荧光素(呈黄绿色),故能渗入培养基内,使培养基变为黄绿色。数日后,培养基的绿色逐渐变深,菌落表面呈现金属光泽。普通肉汤均匀混浊,呈黄绿色。液体上部的细菌发育更为旺盛,于培养基的表面形成一层很厚的菌膜。但普遍使用有效抗生养素后筛选出的变异株常丧失其合成能力。由于铜绿假单胞菌能产生绿脓酶,可将红细胞溶解,故菌落周围出现溶血环。
铜绿假单胞杆菌与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;检测灵敏度可达10~100拷贝;该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。PCR反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法与热启动法相结合,更能有效地减少PCR过程中的非特异性反应,增强PCR扩增的特异性,能得到良好的PCR结果。因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。根据模板DNA的量以及扩增片段的大小,设定25~30个循环。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,则会出现Smear。枯草芽孢杆菌易在枯草浸汁中繁殖,故名。
关于铜绿假单胞菌的砂土保存法,主要是取清洁的砂,过60目筛去掉大砂粒,并用磁铁吸去砂中铁屑,再用NaOH溶液、10%HCl溶液和水交替清洗数次,干燥后,置于试管或安瓶管中保持2~3cm深,再经干热灭菌后,加入1毫升菌种培养液,经充分混匀后,放入真空干燥器中,完全干燥后熔封保存。也可用二份洗净的砂(经HCl预处理)和一份贫瘠、过筛的黄土搀和后灭菌,再进行菌种保藏。在螺旋口试管中装入1/2管高的硅胶(或无水CaSO4),上铺玻璃棉,再放上10~20粒磁珠,经干热灭菌后,接入菌悬液,然后冷藏、室温保藏或减压干燥后密封保藏。本法对酵母菌很有效,特别适用于根瘤菌,可保存长达两年半时间。枯草芽孢杆菌能够增加土壤养分、改良土壤结构、提高肥料利用率。马德普拉塔无色杆菌菌种
不同种的金黄色葡萄球产生不同的色素,如金黄色、白色、柠檬色等,色素为脂溶性。马德普拉塔无色杆菌菌种
大多数铜绿假单胞菌资源研究利用基本上是以得到纯的培养物为前提,而真类菌在培养的过程中,必然离开原来的生长环境,营养、环境条件发生改变,这是真类菌发生性状改变的重要因子,真类菌培养物长期保藏就会不可避免的发生性状变化。难以培养的真类菌以及一些专性寄生真类菌不能在人工培养基上培养生长,其主要原因是在目前认知条件下,不能够提供此类微生物生长所需的必要条件。此外,丝状真类菌保藏一般采用保藏真类菌的孢子、菌丝,其中保藏真类菌的孢子一般周期较长,活性较为稳定,但无论在无性阶段产生分生孢子还是有性阶段产生的性孢子,都是经过基因重组阶段,这就增加了保藏菌株发生变异的可能性。马德普拉塔无色杆菌菌种
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