铜绿假单胞菌低温保存法主要为简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4摄氏度冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月。液氮较低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至-35摄氏度时,即可置于-150~-196摄氏度的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。铜绿假单胞菌是一种良好的交叉保护抗原。梭形芽孢杆菌
铜绿假单胞菌对化学药物的抵抗力比一般革兰氏阴性菌强大。1:2000的洗必太,度米芬和新洁尔灭,1:5000的消毒净在5分钟内均可将其杀死。0.5-1%醋酸也可迅速使其死亡。有些菌株对磺胺,链霉素,氯霉素敏感,但极易产生耐药性。青霉素对此菌无效,但庆大霉素和多粘菌素B,E,氨基甙类、头胞类等抗生养素作用较明显。联合用药可减少耐药菌株的产生。铜绿假单胞菌是院内影响的常见病原菌,所以消毒措施对预防影响有重要作用。由于铜绿假单胞菌菌型多,与毒力有关的物质也有多种,因此理想的菌苗仍在研制之中。铜绿假单胞菌对抗抵菌药物主要存在产生抗生养素灭活酶或抗生养素修饰酶;改变抗抵菌药物作用的靶位,从而逃避抗抵菌药物的抗抵菌作用;膜屏障与主动外排,限制药物达到其作用靶位。形成生物膜。Amycolatopsis albidoflavus菌株铜绿假单胞菌为土壤中存在的较常见的细菌之一。
金黄色葡萄球菌的检验方法操作步骤:血浆凝固酶试验:吸取1:4新鲜兔血浆0.5mL,放入小试管中,再加人培养24h的金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤堵养物0.5mL,振荡摇匀,置36℃士1℃温箱或水浴内,每半小时观察一次,观察6h,如呈现凝固,即将试管倾斜或倒置时,呈现凝块者,被认为阳性结果。同时以已知阳性和阴性葡萄球菌株及肉汤作为对照。直接计数方法6.2.1吸取上述1:10混悬液,进行10倍递次稀释,根据样品污染情况,选择不同浓度的稀释液1mL,分别加人三块Baird一Parker平板,每个平板接种量分别为0.3mL、0.3mL、0.4mL,然后用灭菌L棒涂布整个平板。如水分多不易吸收,可将平板放在36℃士1℃lh,等水分蒸发后反转平皿置36℃士1℃培养。
从作物的根际土壤、根表、植株及叶片上分离筛选出的枯草芽孢杆菌菌株对不同作物的众多真类菌和细菌病害具有拮抗作用。如粮食作物中的水稻纹枯病、稻瘟病,小麦纹枯病,豆类根腐病等;蔬菜病害中的番茄叶病、枯萎病,黄瓜枯萎病菌、霜霉病,茄子灰霉病和辣椒疫病等。枯草芽孢杆菌还可以控制采后水果的多种病害,如苹果霉心病,柑橘青霉病,油桃褐腐病,草莓灰霉病和香蕉枯萎病、冠腐病、炭疽病,苹果及梨青霉病、黑斑病、溃疡病,金花梨果腐病等。此外,枯草芽孢杆菌对杨树溃疡病、腐烂病、树黑斑病及炭疽病,茶轮斑病,炭疽病、黑胫病、赤星病菌、根腐病,棉花立枯病、枯萎病等也有较好的防治作用。枯草芽孢杆菌定殖、繁殖速度更快。
枯草芽孢杆菌用量少,为减少浪费,兑药时应用小容器将所需用量药剂充分溶解后再倒入喷雾器中,加水至喷雾器较佳水平线进行喷雾;早上10点前或下午4点后施药,避免阳光直射,杀死芽孢。尤其是4点后用药,夜间潮湿的环境更有利于芽孢萌发。不能与铜制剂、链霉素等杀菌剂及碱性农药混用;病害初期或发病前施药效果较佳,施药时注意使药液均匀喷至作物各部位。枯草芽孢杆菌的溶菌作用主要表现在是通过吸附在病原菌的菌丝上,并随着菌丝生长而生长,而后产生溶菌物质造成原生质泄露使得菌丝体断裂;或者是产生抗类菌物质通过溶解病原菌孢子的细胞壁或细胞膜,致使细胞壁穿孔、畸形等现象从而抑制孢子萌发。枯草芽孢杆菌在液体培养基中生长时,常形成皱醭。地霉属菌株
金黄色葡萄球是革兰氏阳性菌表示,为一种常见的食源性致病微生物。梭形芽孢杆菌
关于铜绿假单胞菌的干冰保存法一般为-70摄氏度左右,即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。液氮保存法一般为-196摄氏度,是适用范围较广的铜绿假单胞菌保存法。冷冻干燥保存法的原理是首先将铜绿假单胞菌冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分。从菌体中除去大部分水分后,细胞的生理活动就会停止,因此可以达到长期维持生命状态的目的。绿脓假单胞菌(绿脓杆菌)保存操作流程是,菌株复苏按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏,隐球菌除传显色培养基以外,另传1/2块血平皿上述菌株统一37摄氏度孵育48小时。菌种鉴定一般在48h后观察结果。保藏方法是传代培养。梭形芽孢杆菌
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