天津正规鼠尾胶原厂家现货

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明：不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul 10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液对初步处理的鼠尾腱进行酶解。天津正规鼠尾胶原厂家现货

鼠尾胶原备用胶凝程序：1）在冰上放置以下物品：胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1M NaOH。2）确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3）在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4）在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS（终体积/10）mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积（不要添加到管中直到步骤4.6为止）终体积x终胶原蛋白I浓度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的胶原体积×0.023）mL的无菌冰冷1M NaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水：添加蒸馏水体积=V（终）—V（胶原蛋白）—V(10× PBS）—V（1M NaOH）4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积，混匀，冰上备用。5）胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6）使用时，无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。重庆鼠尾胶原厂家批发价鼠尾型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。

含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23ul 10xPBS或10x培养液，混匀(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。

实验应用：鼠尾胶原为底物的人鼻腔纤毛上皮细胞培养模式的建立目的建立以鼠尾胶原为贴附底物的人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式，为人鼻腔黏液纤毛运输系统的研究提供科学有效的方法.方法制备鼠尾胶原并铺片，以鼠尾胶原为贴附底物组织块培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞，培养7天时进行HE染色及扫描电镜和透射电镜观察细胞形态和结构，应用高速摄像技术测量纤毛摆动频率.结果鼠尾胶原要平坦均匀，平均厚度约为1mm；HE染色可见上皮细胞呈单层向周围爬开；扫描电镜下见纤毛上皮细胞呈不规则多角形，纤毛周围可见微绒毛;透射电镜下可见纤毛上皮细胞间为紧密连接；同一细胞任意两点纤毛摆动频率是相同的；同一来源体外培养的钩突和下鼻甲的纤毛摆动频率是相同的.结论以鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立，为今后研究鼻内用药对纤毛清理功能的影响提供了良好的方法和途径。涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：两组培养皿中，随着过氧化氢浓度的增高，均可见细胞凋亡状态明显加重，细胞存活率及细胞内过氧化氢活力明显下降，细胞凋亡率及细胞内丙二醛水平明显增高，Bcl-2/Bax比值明显降低，呈剂量依赖性。而在相同浓度过氧化氢诱导下，与对照组相比，实验组细胞凋亡状态明显减弱，细胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高，细胞凋亡率和丙二醛水平明显减低。表明鼠尾胶原对过氧化氢所致的心肌细胞氧化损伤具有保护作用，其机制可能与提高超氧化物歧化酶活力，减少丙二醛产生及提高Bcl-2的表达有关。在冰水浴中将粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶胀。天津正规鼠尾胶原厂家现货

整个操作请于冰上进行，因室温下鼠尾胶原I可迅速成胶。天津正规鼠尾胶原厂家现货

鼠尾胶原蛋白的获取也相当“讲究”，首先要以无毒方法捕到家鼠。取尾长20cm以上者，齐尾根部切下尾巴，洗净后浸于75%酒精中。在无菌操作下剥去鼠尾皮肤，即可见附于鼠尾骨上的4束韧带。每束韧带中，位于外面及近骨一面的为白色纤维，较光洁，微发亮。纤维之间为易碎裂的间质。而剥去下来的“纤维”，就放置在嘉兴眼库中，以供需要时及时提取。让小小的老鼠尾巴发挥其神奇的作用，以医学人严谨、踏实、不断进取的医学态度，让鼠尾胶原蛋白帮助更多的人，恢复角膜的光明，重现光明的世界。天津正规鼠尾胶原厂家现货

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