外泌体用于细胞学或动物实验前的无菌处理 已经经过上述方法制备的外泌体在进行细胞或动物实验之前还需进行一步除菌过滤,这个时候考虑到得率,应该采用离心法处理,以减少过滤时的外泌体样品损失。 超滤方法纯化具体操作步骤举例 Amicon® Ultra-15 超滤管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip®真空抽滤对样品进行澄清[目录号SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon® Ultra-15 超滤管(目录号UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g离心 X 10 min。 从超滤管内管及收集管吸走PBS。向超滤管加入15 mL 样品。4000g 离心30 min 浓缩。倒空收集管。加入14 mL PBS 进行缓冲液置换,温柔吸打样品数次。4000g离心 30 min。从浓缩管吸回处理好的样品。(30X 浓缩) 注意 : 所有 Amicon® Ultra 超滤管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 与此操作流程兼容 *上海超滤浓缩管供应商。长宁区默克离心浓缩管哪家好
虽然影响因素较多,我们通常建议截留分子量约为目的分子分子量一半的膜,这样可以比较大化样品的回收,同时节省过滤时间。截留微滤中膜的孔径大小通常以微米计,表示大于这一规格的颗粒将被膜截留。超滤膜根据NMWL分级,有时也用截留分子量(MWCO)。NMWL表示大多数大于这个值的分子将在超滤时截留。一个确定NMWL的超滤膜应该截留至少90%以上的这个大小的球形分子。但为了保险起见,实践中选择的膜孔径要小于目的分子。缓冲液置换时 膜截留分子量应该充分大于流过的溶质。当膜材料相同时,孔径减小 会增加排阻而减小滤过率。截留及产物回收的影响因素包括分子的形状、带电性质、样品浓度及组成成分、操作条件、使用的设备构造等。因此常常发生同样 NMWL 的膜对一定范围内的不同分子截留效果有一定差异的情况。使用超滤方法进行样品浓缩或除盐时,需要谨慎地选择合适的 NMWL膜和设备。虽然影响因素较多,我们通常建议截 留分子量约为目的分子分子量一半的膜,这样可以比较大化样品的回收,同时节省过滤时间。默克0.5ml超滤浓缩管代理商你知道上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好吗?
多台同时操作模式 借助Amicon®超滤杯多台操作连接装置可以同时运行多达3个超滤杯。 Amicon® stirred cells 耐溶剂型搅拌式超滤杯 用于对在有机溶剂中的样品进行浓缩和缓冲液置换。有 47mm 和 76mm 两种规格。需要注意醛、酮(如**)、醚酯等会降低碳氟化合物材质 O 形圈的使用寿命。 特点与优点: 采用圆柱形硼硅酸盐玻璃容器和 PTFE 超好化学兼容性超滤膜 可预装膜后进行高压灭菌 直接从上面操作,避免拆卸装置的麻烦 组件少,易于清洁和组装 配套使用 47 或 76 mm 直径预切膜片 应用: 带有有机成分的样品的浓缩、换液
操作模式 常规与切向流 : 常规溶液过滤(NFF)中液体在压力或真空驱动下直接流 过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上,小分子则通过膜流出。NFF 常 用于无菌过滤、澄清预过滤及*** / 蛋白样品制备等。切向流过滤(TFF) 液体流过时与膜表面呈一定角度,被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表 面,而且还会被切向流从膜表面扫除,因此 TFF 成为按分子大小不同分离 的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法,而现在,TFF 技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中,使小体积样品的浓缩 和分离操作也变得更加方便。上海超滤浓缩管哪家比较好?
蛋白复性,温和透析 D-Tube™ 透析管 如果样品很敏感而难以处理,采用温和的透析方法可以避免其在过度浓缩时发生沉淀和离心操作剪切力对样品的损害。。D-Tube™是双膜设计的透析管,**提高了样品透析表面积,在2-5小时内即可完成透析,是非常温和而高效的缓冲液置换工具。D-Tube™ 透析管的独特优点: 样品回收率> 89% • 膜和管壁皆为低吸附性材质,增加样品回收率可靠而易用 • 不会像使用夹子或打结那样造成样品渗漏和污染,安全可靠 旋盖式设计,易于打开和关紧 硬管设计,易于更充分地吸取、移走样品,即使是μL级样品加样方便,功能多样 • 采用标准***头加样,而非注射器和针头加样,减少膜破损的风险提供的浮漂适合在常见的广口烧杯中使用,方便在透析过程中换液D-Tube™ 透析管还可以用于从琼脂糖或丙烯酰凝胶电洗脱样品超滤浓缩管的主要优势是什么。宝山区默克0.5ml超滤浓缩管订购
上海超滤浓缩管代理销售哪家比较好?长宁区默克离心浓缩管哪家好
截留 截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近 的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强 度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下 会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择 合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择 为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。长宁区默克离心浓缩管哪家好
上海益启生物科技有限公司拥有 从事生物科技(除生物试剂)领域内的技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让;室内外装潢;建筑工程设计与施工;展览展示服务;计算机及配件、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)实验室设备、服装服饰及辅料、仪器仪表、电子数码产品、普通劳防用品、文体用品的销售。等多项业务,主营业务涵盖试剂,耗材,科研试剂,仪器设备。公司目前拥有专业的技术员工,为员工提供广阔的发展平台与成长空间,为客户提供高质的产品服务,深受员工与客户好评。公司业务范围主要包括:试剂,耗材,科研试剂,仪器设备等。公司奉行顾客至上、质量为本的经营宗旨,深受客户好评。公司深耕试剂,耗材,科研试剂,仪器设备,正积蓄着更大的能量,向更广阔的空间、更宽泛的领域拓展。