c ) 用无血清的冷培养基稀释ECM 胶至2 0 µ g/mL ,以5-10µg/cm2的密度加入到细胞小室的上层(按照ECM产品说明书的推荐比例和体积),轻轻摇晃使胶均匀铺在膜上。以上操 作在冰上进行。 d)立即将铺好ECM胶的细胞小室置于培养板中,于37°C孵育1小时,ECM胶可由液体凝成固体,吸走多余的或者未凝的胶。细胞用PBS清洗一次,EDTA或者0.05%胰酶消化,然后用包含5%BSA的无血清培养基中和,1500rpm离心5-10min。用无血清培养基重悬细胞,调整细胞密度至0.5-2.0x106cell/ml。哪家血清是有正规授权的?闵行区添加剂细胞培养销售
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本实验技术要点: **细胞比较好经过饥饿处理,并且小室上下培养基的FBS有浓度差,以保证细胞可以穿透基质胶。铺细胞要均匀,滤膜底部不能产生气泡,否则会导致细胞染色不均匀,或者局部细胞无法穿透。根据细胞类型选择合适的膜孔径和膜类型。PET膜兼容***,适合绝大多数种类的细胞。侵袭实验的细胞密度比较大,一般在1 0 6cells/cm2左右,不同**细胞的接种密度、培养时间不同,需要参考文献和实验摸索。细胞太少,迁移不过去;细胞太多,可能导致正常组和实验组无差异。
•InhibitorSelect™激酶家族***剂文库 •StemSelect™干细胞调节剂文库 •大包装定制***剂 •定制小分子化合物库 细胞培养器具 更好的细胞形态学 因为可便利地从各方向获取营养,故细胞在膜上生长比在塑料上生长更好。 Millicell @单孔细胞培养小室 细胞生长在膜上较塑料基质更接近自然状态 Millicell®单孔插入式细胞培养小空分为悬挂式和站立式两类,无论贴壁细胞或悬浮细胞都可以从其上下两侧吸收培养基。因此,细胞的生长、结构及其功能都更接近发生在体内的情况。而且, Millicell®插入式细胞培养小窒使得单层细胞的上下两面进行研究成为可能。上海益启生物培养基订购方便。
实验简介: 药物研究包括吸收、分配、代谢、排泄和毒性等多个方面,而吸收是第一步。这个实验在以内皮细胞通透性、药物渗透等为研究方向的课题中很常用。 常见检测细胞: 人结肠腺*细胞系 Caco-2、HT-29、Lovo、SW-480,人结肠上皮细胞 T84,狗肾上皮细胞系 MDCK,猪肾上皮细胞系LLC/PK1 等,主要模型为上皮细胞吸收、血脑屏障。 具体操作: 上皮细胞生长到细胞汇合度达80-90%时开始实验,不要超过90%,否则会影响到后续细胞单层的形成。将细胞均匀接种在小室膜上。对于24孔板和96孔板的接种密度见本文图示。上海益启生物酶订购方便。松江区干细胞培养细胞培养商家
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主要优点 •两种过滤装置均有快速过濾的Millipore Express PLUS (PES)和**蛋白吸附的Durapore膜两种材质可选 •过滤中培养基损失极小,回收率超高 •孔径的过滤装置推荐用于去除支原体 Sterivex™过滤器 Sterivex™过滤器可以结合注射器、蠕动泵或压力装置使用,避免因倾倒或移液带来的污染。 主要优点 •比较好处理100 mL-2 L •可以直接过濾至几乎任何接收容器 •有多种***膜类型可供选择 不锈钢平板式过滤器 •根据不同的处理体积有90mm及142mm可供选择 •通过加压过濾来清洁或消毒液体与气体 •特氟隆镀面的支撑网 •可以将滤膜装入后整体进行高压消毒闵行区添加剂细胞培养销售
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