原代细胞的获取：1.培养时间无论是酶消化法还是组织块法，取样后培养时间较少需要一周以上的时间，期间可换液或者传代。2.换液时间无论酶消化法还是组织块法，在培养期间需要随时关注细胞的生长状况，需观察其是否贴壁，是否污染，组织块法要观察是否有细胞迁移出来。正常情况下48~72h可换液一次。3.细胞状态判断正常贴壁细胞在培养几天后，会逐渐贴满整...

  细胞冻存液常见问题：1.从繁衍期到产生高密度的单层细胞之前的塑造体细胞都能够用以冻存，但较好是为多数成长期体细胞。在冻存前一日较好是换一次细胞培养液;2.将冻存管放进液氮容器或从这当中取下时，要搞好安全防护工作中，以防冻坏;3.冻存和再生较好用新配置的细胞培养液。细胞冻存的基本原理：细胞代谢过程需要各种蛋白酶的参与，而这些蛋白酶在环境温度...

  细胞外基质的概念：细胞外基质,extracellularmatrixc,ECM,由细胞分泌到细胞外间质中的大分子物质，构成复杂的网架结构，支持并连接组织结构、调节组织的发生和细胞的生理活动。在生物学、细胞外间质或细胞外基质(Extracelularmatrix，ECM)是动物组织的一部分,不属于任何细胞。细胞外间质决定结缔组织的特性。细胞...

  糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2）0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。（3）蒸馏水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分钟。（Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用）（5）流水冲洗10分钟。（6）苏木素浸染细胞核2-3分钟。（7）脱水、透明、封盖。结果...

  糖原D-PAS染色液注意事项：1、切片脱蜡应尽量干冷，否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。2、过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时温度以18～22℃较佳。3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳光和空气，使用前较好提前取出恢复到在室温后，避光暗处使用。4、酸性乙醇分化液应经常更换新液，其...

  粘液染色法：粘液一般有以下几点特性：（1）对盐基性染料有亲合力，因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。（2）对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。（3）遇醋酸发生沉淀，胃粘蛋白则除外。（4）溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种：1、P．A．S染色法：操作方法同前，结果；中性粘液性物质，某些酸性粘液物质呈红色，核呈蓝色。2...

  原代细胞与细胞系：永生化细胞系通常具有更快的倍增时间并可持续地分裂，为实验提供一致的研究工具。然而，每次分裂都会引起遗传漂移，降低了它们的生物学相关性。其优点在于，当需要相同的遗传背景时，可以从一个细胞系产生整个克隆群体以具有相同的基因型。但是，哺乳动物原代细胞是生命科学研究中不可或缺的一环，因为它们在生理上类似于供体组织并保留其天然异质...

  原代细胞的培养与建系细胞的来源多样，培养方法也各不相同，凡是来源于胚胎、组织部位及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开展单细胞克隆、纯化，经大量扩增后所形成的生物学特性...

  PAS染色的临床意义：1.红细胞系统：①红血病或红白血病时幼红细胞可呈阳性反应，有时阳性反应幼红细胞的百分比增高，阳性反应的程度也很强。有时红细胞也呈阳性反应。②缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血（又称地中海贫血）以及骨髓增生异常综合征时幼红细胞可呈阳性反应，有时阳性反应幼红细胞的百分比也较高。有时红细胞也可呈阳性反应。③巨幼细胞性贫血、溶...

  染色的一般原则：因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照，进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素FITC，EGFP激发光：488nm发射光：525nm;使用面较广，价格便宜。PE激发光488nm发射光575nm，此荧光的激发效率较佳，故此荧光得...

  糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒简介糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色液不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质，以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸（又称高碘酸）是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1...

  悬浮型原代细胞：1）必须保持细胞的悬浮状态。可以通过增加培养液的黏度来帮助细胞呈悬浮状态，如给培养液中加入低浓度的透明质酸复合物。在有搅拌装置的培养器皿内加入培养液，以5ml为较低限度，否则搅拌时会产生气泡对细胞造成伤害。使用这种方式需注意勿使搅拌速度过快，否则即可使培养液溢出又容易造成污染。如果培养液的量在5ml以下，可以采用旋转瓶培养...